Proteinas

PRÁCTICA 5. PROTEÍNAS

OBJETIVO GENERAL: Conocer las propiedades de las proteínas y algunos de los grupos funcionales que las constituyen, utilizando métodos caloríficos.

OBJETIVO ESPECÍFICO: Realizar cada uno de los experimentos que se indican en la práctica, observar y explicar cada uno de los resultados obtenidos en la práctica.

RESULTADOS

EXPERIMENTO 1. REACCIÓN DEL MILLÓNOBJETIVO: Conocer en que consiste el reactivo del millón realizando el experimento.

* Preparar una serie de 4 tubos de ensaye numerados, coloque en cada uno, 2ml de una de las soluciones siguientes: Peptona, Caseína, Gelatina y Albúmina.
* Posteriormente añadir 5 gotas del reactivo de Millón. Calentar ligeramente hasta que la solución hierva. ¡PRECAUCION!. La presencia de tirosina se pone demanifiesto por la aparición de un precipitado blanco el cual por acción del calor se vuelve rojo. La presencia de sales así como soluciones muy alcalinas pueden interferir en esta reacción.

*REACTIVO DEL MILLÓN: Esta reacción se debe a la presencia de grupos hidroxifenilos (C6H5OH) en la molécula proteica. Cualquier compuesto fenólico que no esté sustituido en la posición 3, 5, como latirosina, fenol y timol, dan lugar a la reacción. De estos compuestos, solamente la tirosina se encuentran presentes en las proteínas, de manera que la reacción de Millon tiene lugar únicamente con las proteínas que tienen tirosina; La prueba no es satisfactoria para soluciones que contienen sales inorgánicas en gran cantidad, ya que el mercurio del reactivo de Millon es precipitado y se vuelveinactivo, razón por la que este reactivo no se usa para medir albúmina en la orina. Si la solución a examinarse es muy alcalina debe ser previamente neutralizada, ya que el álcali precipita también el mercurio en forma de óxidos amarillos.

OBSERVACIONES

TUBO | PROTEÍNA |
1 | PEPTONA: Color naranja rojizo |
2 | CASEÍNA: Adquirio turbidez |
3 | GELATINA: Color amarillo transparente |
4 |ALBÚMINA: Amarillo claro. |

EXPERIMENTO 2. REACCIÓN DEL BIURET

OBJETIVO: Realizar el experimento y anotar las observaciones y resultados obtenidos.

* Preparar una serie de tubos de ensaye numerados, colocar en cada uno 1ml de las siguientes proteínas: peptona, caseína, gelatina y albúmina.
* Añadir 2 ml de solución de NaOH al 10%. ¡PRECAUCIÓN! Y 3 gotas de solución de CuSO4 al 1% .Agitar los tubos y observar la reacción que se produce en cada caso. La aparición de una coloración violeta o rosa en no más de 20 minutos, se considera como prueba positiva.

1) ¿Se puede considerar al biuret como una reacción característica para todas las proteínas?
No, esta reacción está dada solo por aquellas sustancias cuyas moléculas contienen dos grupos carbamino unidos directamente oa través de un solo átomo de carbono o nitrógeno.
2) Escribir la reacción.

OBSERVACIONES

TUBO | PROTEÍNA |
1 | PEPTONA: COLOR LILA |
2 | CASEÍNA: COLOR LILA PÁLIDO |
3 | GELATINA: COLOR MORADO |
4 | ALBÚMINA: COLOR MORADO CLARO |

EXPERIMENTO 3. REACCIÓN XANTOPROTÉICA

OBJETIVO: Observar los resultados que se obtengan y anotarlos.

* Preparar una serie de 4 tubos deensaye, numerados, agregar en cada uno 2mL de una de las siguientes soluciones: peptona, caseína, gelatina y albúmina.
* Añadir 1mL de ácido nítrico concentrado (HNO3),¡PRECAUCIÓN! Calientar a baño maría ligeramente y observar una coloración amarilla característica. Dejar enfriar esta solución y añadir unas gotas de hidróxido de amonio (NH4OH) concentrado cuidadosamente, inclinando el tubo ydespacio, para estratificar. En la interfase se observara un anillo naranja.

1) Se puede considerar esta reacción general para todas las proteínas?
No, ya que es debida a la formación de un compuesto aromático nitrado de color amarillo, cuando las proteínas son tratadas con ácido nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de...