Pruebas Bioquímicas Y Aplicación De Claves Para Identificar Algunos Géneros De Bacterias

PRUEBAS BIOQUÍMICAS Y APLICACIÓN DE CLAVES PARA IDENTIFICAR ALGUNOS GÉNEROS DE BACTERIAS












Isaac Vergara Urango
David López Ricardo
José Barreto Márquez











M.Sc Aydee Muñoz Nuñez











UNIVERSIDAD DE SUCRE
FACULTAD DE EDUCACIÓN Y CIENCIAS
PROGRAMA DE BIOLOGÍA
MICROBIOLOGÍA GENERAL
SINCELEJO-SUCRE
2011


INTRODUCCIÓN

Laidentificación de un aislamiento bacteriano puede realizarse utilizando diferentes combinaciones de características y diferentes criterios en la evaluación de similitudes.

Los ensayos bioquímicos tradicionalmente utilizados, llamadas pruebas bioquímicas convencionales, generalmente determinan la actividad de una vía metabólica (conjunto de reacciones químicas) a partir de un sustrato que seincorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer transforma o no.

Existen diferentes sistemas que facilitan la realización de tales ensayos, porque proponen el mejor conjunto de pruebas bioquímicas para la identificación de un grupo bacteriano, porque simplifican la interpretación de un resultado utilizando un valor numérico, porque proveen los reactivos listos para su uso o porque sontotalmente automatizables.

Las pruebas o ensayos bioquímicos, son pruebas simples que se han desarrollado para demostrar en forma clara una determinada característica bioquímica como presencia o ausencia de una determinada actividad enzimática, grupo de enzimas o determinada vía metabólica, crecimiento a una determinada temperatura, crecimiento en presencia de inhibidores, etc. No significan deninguna manera un estudio profundo del metabolismo bacteriano.

Para llevarlas a cabo, se pueden utilizar diferentes sistemas de trabajo (medio de cultivo, indicador, revelador, etc.) que puede ser diferente aún para el mismo ensayo si se trata de diferentes microorganismos. Por ejemplo se debe suplir con factores de crecimiento el medio de cultivo para estudiar la fermentación de distintosazúcares cuando se sabe que el microorganismo en estudio es exigente.

AGAR CITRATO

La utilización de citrato como única fuente de carbono es una prueba útil en la identificación de enterobacterias. La utilización de citrato como única fuente de carbono se detecta en un medio de cultivo con citrato como única fuente de carbono mediante el crecimiento y la alcalinización del medio. Este aumento de pHse visualiza con el indicador azul de bromotimol que vira al alcalino a pH 7,6.

P. INDOL

El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptofano. Las bacterias que poseen la triptofanasa son capaces de hidrolizar y desaminar el triptófano con producción de indol, ácido pirúvico y amoníaco. La producción de indol es una característica importante para laidentificación de muchas especies de microorganismos. La prueba de indol está basada en la formación de un complejo rojo cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído. Este es el principio activo de los reactivos de Kovacs y Ehrlich. El medio de cultivo utilizado debe ser rico en triptófano.

OXIDASA.

Existen especies bacterianas que poseen el "citocromo C" dentro dela cadena respiratoria. La presencia o ausencia de este citocromo en bacterias es una característica fisiológica muy utilizada en taxonomía. Esta prueba se denomina corrientemente como oxidasa y consiste en tomar con la punta de un asa una pequeña cantidad de cultivo bacteriano de 24-48 horas de edad y transferirlo a un trozo de papel filtro previamente embebido en n,n-dimetil p-fenilendiamina,ésta es rápidamente transformada a un producto oxidado de color púrpura dentro de 30 segundos en presencia de citocromo oxidasa. Se debe tener la precaución de no utilizar un asa con su punta oxidada para evitar así una reacción falsa.

Esta prueba se puede utilizar para diferenciar bacterias del género Pseudomonas, donde generalmente las fitopatógenas son negativas (Ej. P. syringae pv....