pruebas bioquímicas

PRUEBAS BIOQUIMICAS
¿Qué son las pruebas bioquímicas?
Consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, nos permite identificar distintos microorganismos presentes.
Su sistema de funcionamiento consiste en determinar la actividad de una vía metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo.
Pruebas más utilizadasen la área de bacteriología:
En las gram (+) tenemos la prueba catalasa, oxidasa y coagulasa.
Las gram (-) son las pruebas de indol, urea, citrato, RM (rojo de metilo), VP (vogas proskaver), fermentación de carbohidratos, producción de acido sulfhídrico y fermentación con producción de gas.
PRUEBA CATALASA: La enzima catalasa se encuentra en la mayor parte de las bacterias aerobias y anaerobiasfacultativas que contienen citocromo (excepto el streptococcus) generalmente las bacterias que carecen de citocromo también carecen de catalasa, lo que les impide descomponer el peróxido de hidrogeno.
La catalasa descompone el peróxido de hidrógeno (H2O2) en agua y oxígeno bajo la fórmula 2 H2O2-->2 H2O + O2. De esta manera las bacterias se protegen del efecto tóxico del H2O2, que es un productofinal del metabolismo aerobio de los azúcares.
PRUEBA OXIDASA: Sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reacción de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromo-oxidasa que activa la oxidación del citocromo que es reducido por el oxígeno molecular que produce agua o peróxido de hidrógeno según la especie bacteriana.
La prueba de la oxidasa se usa sobre todo para:Identificar todas las especies de Neisseria (+)
Diferenciar Pseudomonas de los miembros oxidasa negativos de las enterobacterias.
PRUEBA COAGULASA: Permite separar Staphilococcus aureus, que produce la enzima coagulasa, de las otras especies de estafilococos que se denominan coagulasa negativos
PRUEBA DE INDOL: El indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácidotriptófano. Las bacterias que poseen la triptofanasa son capaces de hidrolizar y desaminar el triptófano con producción de indol, ácido pirúvico y amoníaco. La producción de indol es una característica importante para la identificación de muchas especies de microorganismos. La prueba de indol está basada en la formación de un complejo rojo cuando el indol reacciona con el grupo aldehído delp-dimetilaminobenzaldehído
PRUEBA RM: La prueba para detectar a los altos productores de ácido es conocida como Rojo de Metilo (MR). La prueba para detectar a los menos productores de ácido está basada en el procedimiento que describieron Voges y Proskauer en 1898 donde se presenta una reacción colorida cuando los cultivos se incuban en un medio conteniendo dextrosa y peptona y se les adiciona hidróxido depotasio exponiéndolos al aire.

FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS: son útiles para complementar los resultados de las pruebas de utilización de los hidratos de carbono cuando existe alguna dificultad para la identificación definitiva de un organismo.
Los medios de fermentación contienen peptona, extracto de ternera o de levadura, un indicador y fuentes de carbohidratos individuales. La fermentación sedetecta únicamente por la producción de gas.
CITRATO: Sirve para determinar si un organismo es capaz de utilizar citrato como única fuente de carbono y compuestos amoniacales como única fuente de nitrógeno en su metabolismo, provocando una alcalinización del medio. Entre las enterobacterias estas características se dan en los siguientes géneros:Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Citrobacter yalgunas especies de Salmonella. Sin embargo, Escherichia, Shigella, Salmonella typhi y Salmonella paratyphi son incapaces de crecer con esos nutrientes.
UREA: Se utiliza para identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como Proteus spp., otras enterobacterias y estafilococos. 
En el medio de cultivo, la tripteína y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos....