Práctica de Bioquímica

PRÁCTICA N° 2

TÍTULO: REACCIONES DE RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS REDUCTORES
REACTIVOS: GLUCOSA, LACTOSA, FRUCTOSA Y SACAROSA

OBJETIVOS:
Observar los espejos de plata que forma la glucosa al adicionarle reactivo de Tollens.
Observar el cambio de coloración de los diferentes azúcares ( glucosa, lactosa, fructosa y sacarosa) cuando se les agrega reactivo de Fehling y se le calienta abaño María.
Observar el cambio de coloración de los diferentes azúcares ( glucosa, lactosa, fructosa y sacarosa) cuando se les agrega reactivo de Benedict y se le calienta a baño María.

MARCO TEÓRICO

REACTIVO DE TOLLENS
El reactivo de Tollens es un complejo acuoso de diamina-plata, llamado así en honor al químico alemán Bernhard Tollens.
Es transparente, incoloro y alcalino.
Elcomplejo diamina-plata es un agente oxidante, reduciéndose a plata metálico, que en un vaso de reacción forma un espejo de plata
Éste es usado para verificar la presencia de aldehídos, que son oxidados a ácidos carboxílicos.
El reactivo de Tollens puede ser usado para discernir si el compuesto es una cetona o un aldehído.
El aldehído se oxida a ácido carboxílico, que es un agente reductor.
Si elreactivo es un aldehído, el test de Tollens resulta en un espejo de plata, la plata suele depositarse formando un espejo en la superficie interna del recipiente de reacción.
En otro caso, puede formarse o no un espejo amarillento.
Es también un test para alquinos con el enlace triple en la posición 1. En este caso se forma un precipitado amarillo de carburo de plata.
Preparación en ellaboratorio
A nitrato de plata acuoso, agregar una gota de hidróxido de sodio diluido. Se formará un precipitado marrón de óxido de plata.
Agregar amoníaco hasta que el precipitado se disuelva totalmente.
Esto es nitrato de plata amoniacal [Ag(NH3)2]NO3 (ac), la forma más común del reactivo de Tollens.
Seguridad
El reactivo debe ser preparado en el momento y nunca almacenado por más de un par dehoras.
Después de realizar el test, la mezcla resultante debe ser acidificada con ácido diluido antes de ser desechada.
Esto previene la formación del explosivo fulminante de plata, que es básicamente nitruro de plata, Ag3N.
REACTIVO DE FEHLING
Es una solución descubierta por el químico alemán Hermann von Fehling y que
Se utiliza como reactivo para la determinación de azúcaresreductores.
Consiste en dos soluciones acuosas:
Sulfato cúprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.
Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 150 g; solución de hidróxido de sodio al 40%, 3 g; agua, hasta 1.000 ml.
Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitación del hidróxido de cobre
Se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilode un aldehído.
Éste se oxida a ácido y reduce la sal de cobre en medio alcalino a óxido de cobre, que forma un precipitado de color rojo.
La forma aldehído puede detectarse fácilmente aunque exista en muy pequeña cantidad
Si un azúcar reduce el licor de Fehling a óxido de cobre rojo, se dice que es un azúcar reductor.
Esta reacción se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunoscompuestos no reductores como la fructosa (que contiene un grupo cetona) puede enolizarse a la forma aldehído dando lugar a un falso positivo.
Al reaccionar con monosacáridos, se torna verdoso; si lo hace con disacáridos, toma el color del ladrillo.
REACTIVO DE BENEDICT
Identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH anomérico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, ycelobiosa.
En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.
El reactivo de Benedict está formado por: Sulfato cúprico, Citrato de sodio, Carbonato anhidro de sodio.
También se emplea NaOH para alcalinizar el medio.
Se fundamenta en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato...