Práctica de Ureasa

Curso de Ayudante Preparador de Laboratorio
Taller II Opción Química Año 2007
Prof. Rosario Culazzo
PROPIEDADES DE LA UREASA
Gebhart- Giurovich - Míguez
RESUMEN
En esta actividad se pretende estudiar las características más importantes que presentan las enzimas y se elige para ello la enzimaureasa, circunscrita al reino vegetal.
La ureasa es una hidrolasa cuyo único sustrato es la urea.
Esta enzima cataliza la reacción entre la urea y el agua formándose -en medio acuoso- carbonato de amonio, la cual da medio básico a la solución. Por lo que la presencia de medio básico indica que hubo reacción química y por lo tanto actividad enzimática. El medio básico se reconoce claramente enpresencia de un reactivo indicador ácido-base, en este caso, el azul de bromotimol dando coloración azul.
La presencia de medio ácido o neutro detectados por el color que toma el reactivo indicador, (amarillo o verde) indica que no hubo actividad enzimática.
Aparte de la actividad enzimática se estudian la desnaturalización por calor, inhibición por metales pesados y especificidad.

INTRODUCCIÓNEsta actividad tiene una amplia utilidad para ser aplicada en diversos niveles de educación media, ya que permite darle diferentes enfoques según los contenidos que se quieran trabajar.
Es una actividad sencilla de realizar, cualitativa, altamente eficaz, y de la cual los alumnos pueden extraer conclusiones acerca del comportamiento de las enzimas en general. Se utiliza a su vez una muestracomercial de porotos de soja para extraer la enzima.
Se utilizan el reactivo de Nessler y el agua de barita para reconocer los productos de reacción como el amoníaco y el dióxido de carbono respectivamente.
Los resultados obtenidos concuerdan con los que se encuentran en bibliografía.

OBJETIVOS
Determinar la actividad, desnaturalización por distintos agentes, inhibición y especificidad de laureasa.

MARCO TEÓRICO
DEFINICIÓN DE ENZIMA:
Desde el punto de vista estructural la mayoría de las enzimas son proteínas. (Aún así, se han descubierto algunos ácidos nucleicos con función enzimática).
Desde el punto de vista funcional las enzimas son catalizadores biológicos.
Un catalizador es aquella sustancia que participa de una reacción química sin consumirse durante la reacción, actúaacelerando o retardando la reacción, la cual no tendría lugar en ausencia del catalizador, o tendría lugar con lentitud.
Las enzimas son los catalizadores de las células vivas. La totalidad de las transformaciones químicas que suceden en el organismo, -metabolismo- sólo es posible gracias a la acción de estos catalizadores. Los sistemas vivos requieren la presencia de las enzimas, ya que lamayoría de las reacciones de metabolismo suponen situaciones desfavorables o poco probables cinéticamente. Éstas proporcionan un ambiente dentro del cual una reacción es energéticamente más favorable.

Químicamente, a excepción de los ácidos nucleicos nombrados, todas las enzimas conocidas hasta la fecha son proteínas, consistiendo en grandes unidades de polipéptidos o proteínas globulares, conmasas moleculares de 10.000 a un millón de u.m.a.s..
En su estructura globular, (una forma de clasificar proteínas es en fibrosas que son insolubles en agua y globulares que son solubles en agua o en soluciones acuosas de bases, ácidos o sales), se entrelazan y pliegan las cadenas polipeptidicas las cuales aportan aminoácidos para formar el sitio activo o lugar de adhesión del sustrato y donde tienelugar la reacción.
Algunas enzimas requieren para su actividad otros componentes llamados coenzimas o cofactores. Estos cofactores son porciones no proteicas de la enzima, tales como iones inorgánicos (por ejemplo catión magnesio, catión hierro (II)), nucleótidos (tales como NADH, o FADH2), o vitaminas. La unión covalente del cofactor con la enzima se llama grupo prostético de la enzima (unión...