Quimica

FUNDAMENTOS

La electroforesis consiste en la migración de iones en un campo eléctrico, se puede llevar en geles de agarosa o poliacrilamida los cuales dependiendo de nuestra muestra a separartendrán diferentes tamaños de poros, de manera que la separación de las moléculas se basa en la filtración por el gel (tamaño y forma de las partículas) así como la movilidad electroforética (cargaeléctrica).

Sin embargo la electroforesis se distingue de la filtración en geles en que la movilidad electroforética es que la movilidad de las partículas mas pequeñas es mayor que la movilidad de las masgrandes cuando la densidad de carga es la misma.
El pH del gel es importante ya que oscila entre un pH de 9 para que casi todas las proteínas tengan cargas netas negativas y se muevan hacia el ánodoen el que se aplica corriente; las moléculas de tamaño y carga similares se moverán en forma de banda a través del gel.

Luego de la electroforesis las bandas pueden observarse al ser reveladascon un colorante que se una fuertemente a las proteínas ( p ej. Azúl brillante de Coomassie), si las proteínas son radiactivas puede tratarse por el método de la autoradiografía, o si se dispone de unanticuerpo contra la proteína de interés puede tratarse con inmunofluorescencia.

RESULTADOS

%T |   | m promedio | M | Log |
  | caseína | 4.65 | 0.845 | 1.92 |
5.5 | ovoalbúmina | 0.95 |0.204 | 1.31 |
  | seroalbúmina | 0.45 | 0.202 | 1.3 |
  | caseína | 4.63 | 0.873 | 1.94 |
7.5 | ovoalbúmina | 4.43 | 0.835 | 1.92 |
  | seroalbúmina | 4.86 | 0.917 | 1.96 |
  | caseína |4.47 | 0.798 | 1.842 |
10 | ovoalbúmina | 4.1 | 0.604 | 1.902 |
  | seroalbúmina | 4.7 | 0.81 | 1.908 |
  | caseína | 2.2 | 0.468 | 1.67 |
12.5 | ovoalbúmina | 3 | 0.625 | 1.796 |
  |seroalbúmina | 2.9 | 0.604 | 1.78 |

Tabla 1: Movilidad electroforética relativa promedio.

Gráfica de Ferguson

ANALISIS DE RESULTADOS

Muestra | # Bandas | Masa molecular | Pendiente |...