quimicas

LABORATORIO 3: CROMATOGRAFÍA DE CAPA DELGADA (CCD)
SEPARACIÓN DE LOS PIGMENTOS DE UNA PLANTA
OBJETIVOS:

Conocer la técnica de CCD, sus características y los factores que en ella
intervienen.


Calcular los valores de Rf de las sustancias separadas.


Deducir a través del Rf, la relación que existe entre la polaridad de las
sustancias que se analizan y la de la fase móvil empleada.

Aplicar la técnica de CCD como criterio de pureza de las sustancias.

ANTECEDENTES:
La Cromatografía es tal vez la técnica más utilizada para separar los varios tipos de
compuestos, que integran las mezclas y se basa fundamentalmente en una
distribución entre dos fases. El método envuelve la remoción selectiva de los
componentes de una fase a medida que esta fase fluye a través de unasegunda
fase estacionaria. La remoción de un componente por la fase estacionaria es un
equilibrio y las moléculas de ese componente vuelven a entrar a la fase móvil. La
separación se debe a que los distintos componentes de la mezcla son atraídos con
distinta fuerza por la fase estacionaria a medida que fluyen a través de ella. Aquel
componente que es atraído con mayor fuerza por la faseestacionaria va quedándose
atrás mientras que el componente atraído con menos fuerza va más adelante que los
demás a medida que van fluyendo a través de la fase estacionaria. Las distintas
velocidades de flujo de los componentes de la mezcla permite que ellos se vayan
separando en zonas o manchas a medida que la mezcla fluye a través de la fase
estacionaria (figura 1). La separación entre laszonas de los componentes es
proporcional a la distancia recorrida por la fase móvil sobre la fase estacionaria. Así
entre mayor sea la distancia recorrida mayor será la separación entre las zonas de
los componentes.

B

A

B
ME ZCL A

A+B

Tiempo 0

A
Tiempo 1

Tiempo 2

Tiempo aumenta
Figura 1

Hay cuatro clases importantes de cromatografía las cuales se basan en losprincipios
mencionados anteriormente. Estas son: cromatografía de columna, cromatografía de
capa delgada, cromatografía de papel y cromatografía de gases.
Los pigmentos naranjados y rojos en las plantas consisten de hidrocarburos llamados
Carotenoides. Los pigmentos verdes consisten principalmente de Clorofila A y
Clorofila B.
En este experimento se tratará de separar los pigmentos de una plantautilizando
cromatografía de capa delgada.

MATERIALES Y REACTIVOS:
1 probeta

1 vidrio de reloj

Metanol

1 espátula

2 erlenmeyers de 50 mL

Cloroformo

3 capilares

2 placas cromatográficas

Éter de petróleo

1 vaso de 400 mL

1 embudo de separación

1 mortero

1 beacker de 100 mL

Papel Filtro

Cada grupo debe traer aproximadamente 10 g de hojas de espinaca, unaregla y
un lápiz de grafito.

PARTE EXPERIMENTAL:


Extracción de la espinaca:

En un mortero muela aproximadamente unos 25 gramos de espinaca con 10 ml de
metanol. Decante la solución de metanol haciendo presión sobre la espinaca
tratando de sacar la mayor parte del solvente. Vote la solución de metanol. Muela la
espinaca con una mezcla de 5 ml de metanol y 10 ml de éter de petróleo(punto de
ebullición de 30 a 60 ºC). Filtre la mezcla a través de un embudo tapado con un poco
de lana de vidrio en un embudo de separación. Vuelva a moler la espinaca con 5 ml
de metanol y 15 ml de éter de petróleo y vuelva a filtrar la mezcla en el embudo de
separación. Estas operaciones extraerán la mayor parte de los pigmentos orgánicos
en la fase de éter de petróleo. Saque la fase inferiorde metanol y vótela.


Aplicación de la muestra:

Como ejemplo de sustancias a separa por cromatografía se han tomado los
pigmentos presentes en las plantas. Estos pigmentos son los carotenos y la clorofila.
Introduzca la punta de un capilar en la solución de los pigmentos. Luego que la
solución haya ascendido en le capilar, retírelo. Toque momentáneamente y con
suavidad con la punta...