Realizarbiometria Hematica

CENTRO DE BACHILLERATO TÉCNOLOGICO
Industrial y de Servicios No. 13

Manual de prácticas

Milady Moreno García

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24 agosto del 2009

PRACTICA No. 1
Determinación de Hemoglobina

Generalidades:
La hemoglobina es una proteína que contiene
hierro y que le otorga el color rojo a la sangre. Se
encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada
deltransporte de oxígeno por la sangre desde los
pulmones a los tejidos.
La hemoglobina también transporta el dióxido de
carbono, que es el producto de desecho del
proceso de producción de energía.
La forman cuatro cadenas polipeptídicas (globinas) a cada una de las
cuales se une un grupo hemo, cuyo átomo de hierro es capaz de
unirse de forma reversible al oxígeno. El grupo hemo se forma por:1. Unión de la Succinil CoA (formado en ciclo de Krebs o ciclo del

ácido cítrico) a un aminoácido glicina formando un grupo pirrol.
2. Cuatro grupos pirrol se unen formando la Protoporfirina IX.
3. La protoporfirina IX se une a una molécula de hierro ferroso
(Fe2+) formando el grupo hemo.

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Cuando la hemoglobina está unida al oxígeno, se denomina
oxihemoglobina o hemoglobinaoxigenada, dando el aspecto rojo o
escarlata intenso característico de la sangre arterial. Cuando pierde el
oxígeno, se denomina hemoglobina reducida, y presenta el color rojo
oscuro o bordó de la sangre venosa (se manifiesta clínicamente por
cianosis).

Oxihemoglobina (HbO 2): Hb unida al oxígeno.
Desoxihemoglobina: Desoxigenada (Hb reducida)
Carboxihemoglobina: Hb unida a CO2. Letal en grandesconcentraciones.
Carbaminohemoglobina o carbohemoglobina: ciertos
aminoácidos de la Hb se asocian al CO2.
Metahemoglobina: Hb con Fe3 (oxidado), así no se une al oxígeno.
Hemoglobina glucosilada (HbA 1c ): Glucosa unida a valina
terminal de cadena Beta. Aumenta en diabetes mal controlada.

Materiales utilizados:
• Boquilla con ligadura
• tubos de ensayo
• Pipetas de shali
• colorímetro• Cubetas para colorimetría
• Reactivo de cianometa
• Estándar equivalente a 20 mg de hemoglobina/dl.
• Sangre total anticoagulada con EDTA.
Técnica

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-Tener limpio todo el material a usar.
-Colocar la boquilla a la pipeta y absorber, hasta 5 micras de sangre.
-Vaciar el contenido de la pipeta
cianometa.

a un tuvo que contiene 5 ml. De

-Tapar el tubo invertirlo dando un girode 260° y dejar reposar 10
minutos.
-pasado los 10 min. Ni un minuto más y ni un minuto menos, vaciar el
contenido a la cubeta dejando un dedo libre de espacio- Meterlo al colorímetro que en el ya tiene adentro una cubeta con
cianometa, y esta a una frecuencia de luz de 420, meterlo mirando las
rayas de la cubeta así a ti mismo.
- leer lo marcado en el colorímetro, y reportarlo.Resultados:

Mediante la fórmula:

ABS. Problema/ ABS. Estándar (.8)(251)=

Valores de referencia
Neonatos, sangre de cordón: 13.6 - 19.6 g/dl
Niños de 1 año : 11.2 dl
Niños de 10 años : 12.9 g/dl
Hombres : 13.5 - 18.0 g/dl
Mujeres : 12.0 - 16.5 g/dl

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PRACTICA No. 2
Determinación de Hematocrito

Generalidades:
El hematocrito es el porcentaje del volumen de la sangre que ocupa lafracción de los
glóbulos rojos.
Las cifras normales de hematocrito en personas oscilan entre: Hombres: de 40.7 a 50.3 %
Mujeres: de 36.1 a 44.3 %
Estas cifras pueden cambiar de acuerdo a diversos factores fisiológicos, como la edad y
la condición física del sujeto, como también del laboratorio donde se realiza el examen.
Valores bajos de Hematocrito están asociados a múltiples posibilidades:desde anemia,
hasta leucemia o artritis reumatoidea, entre otras. Valores altos de Hematocrito se
pueden asociar a deshidratación, eritrocis o hipoxia, entre varios.
Se define como la relación entre el volumen de GR con el de sangre
entera.
• El hematocrito venoso coincide estrechamente con el obtenido
por punción cutánea.
• Se puede medir directamente por centrifugación con
macrométodo o...