REPORTE AN LISIS DE LA MUTACI N HIN F1 EN EL GEN DE LA ENZIMA N5 N10 METILEN TETRAHIDROFOLATO MTHFR

PCR Y BIOLOGÍA MOLECULAR:
ANÁLISIS DE LA MUTACIÓN HIN F1 EN EL GEN DE LA ENZIMA N5,N10-METILEN-TETRAHIDROFOLATO (MTHFR).
INTRODUCCION.
El gen de la MTHFR se encuentra en el brazo corto del cromosoma 1 en la región 1p36.3. La enzima 5,10-metilentetrahidrofolato reductasa (MTHFR) cataliza la reducción del 5,10 metileno tetrahidrofolato (THF) a 5-metilTHF, la forma primaria de folato séricocosustrato para la remetilación de homocisteína a metionina.
El cambio de citosina por timina en la posición 677 (C677T) en el exón 4 del gen que codifica para la enzima 5,10-metilentetrahidrofolato reductasa (alteración se traduce en un cambio alanina por valina en el aminoácido 222 de la proteína) produce una versión termolábil de la enzima que presenta menor actividad, influyendo los niveles séricosde homocisteína. Un segundo polimorfismo genético en la MTHFR denominado A1298C, también disminuye la actividad de esta enzima.
El dinucleótido de flavina adenina (FAD) participa junto con la enzima 5,10-metilentetrahidrofolato reductasa catalizando la conversión irreversible de 5,10-metilentetrahidrofolato a 5-metilentetrahidrofolato, participando como donador de grupos metilo en la remetilaciónde la homocisteína a metionina. La enzima se encuentra en un punto de ramificación metabólica en el dirige la especies de folato hacia la remetilación de la homocisteína a expensas de la biosíntesis de DNA y RNA.

La enzima MTHFR ha recibido mucho interés después del descubrimiento de una variante termolábil de la enzima asociada al aumento del riesgo cardiovascular y a un aumento de homocisteínatotal en plasma. La homocisteína es ahora identificada como un factor de riesgo de enfermedad oclusiva en las arterias coronarias, cerebrales y periféricas; y para trombosis venosa, además también se ha relacionado con la aparición de defectos de tubo neural, otros defectos de nacimiento y complicaciones en el embarazo. La concentración de homocisteína total se eleva en algunas enfermedades ytambién están determinadas por factores genéticos y psicológicos, el estilo de vida y la absorción de folatos, cobalamina, vitamina B6 y riboflavina. Los efectos de las vitaminas se explican por sus funciones como cofactores o cosustratos en el metabolismo de la homocisteína.
En 1955, se reporto el polimorfismo C677T en el gen de la MTHFR. El fenotipo de esta variante genética se caracteriza por unareducida actividad catalítica, presentar termolabilidad in vitro y niveles altos de homocisteína total en condiciones de deficiencia de folatos. Su prevalencia se relaciona con la etnicidad, la frecuencia de los homocigotos para el alelo T (genotipo TT) es de 10% en población caucásica, 20% en población italiana y solo un pequeño porcentaje en población afroamericana.

Los primeros estudios deinvestigación sobre la relevancia clínica del polimorfismo C677T MTHFR se basaron desde el punto de vista que esta simple cambio de base en la secuencia del gen (citosina por timina) produce una enzima defectuosa y como consecuencia de esto una elevación de la homocisteína total. De acuerdo a esto, la mayoría de los estudios se han centrado en enfermedades relacionadas con una elevación de lahomocisteína total, tales como enfermedades vasculares y complicaciones en el embarazo.
La relación entre el polimorfismo C677T MTHFR y las enfermedades puede ser abordada desde dos puntos de vista. Primero, la enfermedad influye en las concentraciones de homocisteína y esto puede sufrir modificaciones por la presencia del polimorfismo C677T MTHFR. Segundo, el genotipo puede estar asociado al riesgo desufrir la enfermedad, posiblemente mediado por deficiencias en el metabolismo de las homocisteína y los folatos.
El análisis de este polimorfismo requiere la amplificación por PCR de un fragmento del gene que codifica para la MTHFR humana sobre el que se detecta la presencia o ausencia de un cambio de base mediante digestión con una enzima de restricción (RFLP).
La enzima de restricción reconoce...