reporte d practica

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITAN

Unidad Xochimilco



“Ciencias Biológicas y de la Salud”
Tronco Divisional
“Procesos Celulares Fundamentales”
Reporte General Prácticas de Laboratorio
“Métodos básicos para el aislamiento e identificación de enterobacterias del agua”
Grupo BB12A
Profesor Jorge Antonio Amézquita Landeros
Trimestre 12 Invierno

Inicio Practicas de Laboratorio:Lunes 27 de Febrero del 2012
Fin Practicas de Laboratorio: Jueves 1 de Marzo del 2012


México, Distrito Federal a 4 de Marzo del 2012.
INTRODUCCIÓN
Considerando que el estudio de la enfermedades transmisibles ocasionadas por microrganismos patógenos constituye el objeto de transformación del modulo “Procesos Celulares Fundamentales” del Tronco Divisional del área Ciencias Biológicas y de laSalud, el objetivo del presente texto es introducir a los alumnos de este modulo en el manejo de los métodos básicos empleados en el laboratorio de microbiología, tomando como modelo el aislamiento e identificación de enterobacterias a partir de muestras del agua.
La metodología descrita consta de cuatro sesiones:
1. Preparación de las muestras y cultivo en un medio selectivo.
2. Aislamiento yobservación de las características macroscópicas y microscópicas de las enterobacterias.
3. Pruebas bioquímicas para enterobacterias.
4. Identificación de las enterobacterias.
Las enterobacteriaceae son bacilos gramnegativos, distribuidos en la naturaleza en una forma amplia. Se encuentran en el suelo, en el agua, sobre las plantas y como su nombre lo indica se encuentran dentro del tractointestinal de los seres humanos y de los animales, y se aíslan con mucha frecuencia de muestras clínicas.
Las enterobacterias son causantes de un gran número de enfermedades infecciosas en el humano, entre las más comunes se encuentran los síndromes diarreicos y disentéricos, causados por cepas de Escherichia Coli, Salmonella y Shigella.
La familia enterobacteriaceae está formada poraproximadamente 31 géneros y 139 especies y miles de serotipos. Algunos miembros de la familia siempre se asocian a enfermedades cuando se aíslan en el hombre, por ejemplo: Shigella, Salmonella, Yersinia Pestis. Mientras que otros son miembros de la flora normal que producen infecciones oportunistas, por ejemplo: Escherichia Coli, Klebsiella Pneumoniae, Proteus Mirabilis.
Primera Sesión
“Preparaciónde las muestras y cultivo en un medio selectivo”
Objetivo
El alumno aprenderá a preparar la muestra y a sembrarla por estría cruzada para obtener colonias aisladas.
Material y Equipo a utilizar
a) 16 Cajas de agar Mac Conkey
b) 4 Tubos estériles con tapón de rosca o de algodón de 16 x 150 ml
c) 4 Pipetas estériles de 10 ml
d) 8 Pipetas estériles de 1 ml
e) 4 Propipetas o pipeteadormanual
f) 4 Mecheros Bunsen
g) 4 Gradillas
h) 4 Pipetas Pasteur
i) 2 Matraces con 250 ml de solución salina isotónica (SSI), estéril.
j) 4 Microscopios

Procedimiento
1. Preparación de la zona estéril para el trabajo microbiológico.
1a) Lava con agua y jabón la superficie de la mesa de laboratorio, déjala secar y desinféctala con la solución de hipoclorito de sodio al 10% que preparaste ocon el benzal diluido 1:10. Coloca el mechero sobre la mesa y enciéndelo, dejar que seque la mesa.
2. Preparación de una dilución 1:10 del agua.
2a) Etiqueta el tubo de 16 x 150 ml estéril con tapón del algodón.
2b) Agita vigorosamente por inversión al frasco con la muestra.
2c) Con una pipeta de 10 ml estéril adiciona al tuno 9 ml de SSI estéril.
2d) Con una pipeta de 1 ml estéril mide 1 mlde tu muestra y viértela en el tubo, para obtener la dilución 1:10.
2e) Cierra el tubo y agítalo unas 5 veces procurando que el tapón no se moje.
3. Siembra del agua y sus diluciones en el medio Mac Conkey
3a) Utiliza un hisopo estéril o en su defecto el asa bacteriológica esterilizada para cada una de las siembras.
3b) Utiliza dos cajas de agar Mac Conkey para cada muestra. Una para la...