Resumen de técnicas recombinantes

Transformación(?) de plásmidos y virus


Los plásmidos son fragmentos extracromosómicos de ácidos nucleicos (ADN o ARN) que aparecen en el citoplasma de algunos procariotas. Son de tamañovariable, con conformación estructural lineal y circular, siendo más común este ultimo. Cada bacteria puede tener uno o varios a la vez y transcriben independientes del ADN cromosómico debido a que no poseenproteínas asociadas.
El proceso de inserción del gen en el plásmido comienza con la selección del gen. (Figura A)


a)
En esta figura tenemos un gen (color rojo) que se desea insertar en unplásmido (color turquesa).

Sucesivamente actúa una enzima de restricción cortando el gen generando adicionalmente extremos pegajosos para la unión posterior. (Figura B)

b)
En lafigura B, una enzima de restricción ha cortado el gen y el plásmido, generando bordes cohesivos o pegajosos.

Finalmente actúa la ADN-ligasa, que tiene como función unir ambas moléculas de ADN.

Enel caso de los virus poseen características similares a los plásmidos, ya que ambos son vectores de transmisión. En el caso de los virus poseen estructura helicoidal, icosaédrica, con envoltura y detipo complejo. También son microscópicos pero existen excepciones. El proceso es similar; se debe insertar el gen en ADN vírico (figura C) para que posteriormente se unan las demás partes del virus(figura D).El ADN se une al virus a través del proceso de transducción.

c)
d)

En la figura C, se inserta el gen deseado en un fragmento de ADN vírico, mientras que en la figura Dcomienza el ensamblaje de las partes del virus.






Integración de elementos extracromosomales dentro del genoma hospedero.

El control de la replicación del plásmido depende del tipo deplásmido, existiendo plásmidos cuya replicación está acoplada con la replicación del cromosoma bacteriano y otros cuya replicación no está relacionada con la del cromosoma. El tipo de genes que portan...