Resumen del libro

2.4.2.    Técnicas para la observación microscópica

Preparaciones: Técnicas para observar en el microscopio electrónico.
En microscopia electrónica, el espécimen que se va a examinar se prepara con una película muy fina y seca sobre pantallas pequeñas y se introduce en el instrumento en un punto situado entre el condensador magnético y el objetivo magnético, comparado con a la platina de luz.La imagen se ve en una pantalla fluorescente por una ventana a prueba de aire o se registra en una placa fotografías por una cámara introducida en el instrumento.
Técnica del sombreado: esta técnica consiste en colocar una capa de metal sumamente delgada, en un ángulo oblicuo sobre el organismo, así que este adquiera una sombra en el lado no cubierto. La técnica del sombreado produce unarepresentación topográfica d3e la superficie del espécimen).

Cortes ultrafino: al hacer observaciones a nivel macromolecular, el material para examen debe ser delgado en grado sumo. Se disponen de técnicas para cortar (rebanar) una célula bacteriana; una célula aislada incluida en material plástico puede cortarse en rebanadas ultrafinas mediante un micrótomo. El uso de colorantes especiales paramicroscopia electrónica, acentúa el contraste de las estructuras.

Tinción negativa: el uso de material denso en electrones, actúan como un colorante que delimita el objeto de la misma manera que el del microscopio de luz. El fosfotungstato, no penetra en las estructuras sino que forma depósitos espesos en las hendiduras.

Técnica a de criofractura: esta técnica se ha ideado para preparar cortesdel espécimen sin recurrir al tratamiento químico del proceso de fijación, que se temía pudieran producir los artefactos. La muestra se corta mientras está contenida en un bloque de hielo, se preparan réplicas en carbón de estas superficies expuestas, las cuales revelan estructuras de la muestra.

Localización de los constituyentes celulares: se han ideado técnicas especiales que hacen posiblelocalizar constituyentes químico de las células. los corte finos de una célula se tratan con anticuerpos marcado con ferritina. La combinación de este anticuerpo con el antígeno en la célula producirá una entidad en la imagen con el microscopio electrónico.

Localización de enzima en cortes ultrafinos: para localizar enzima en los cortes finos se aplican métodos de coloración específicos. Estastécnicas sirven para depositar en el tejido pequeñas partículas densas como el producto final de una reacción química controlada. la estructura célular fina y la actividad enzimática tienen que sobre vivir a la preparación y coloración de los especímenes y, asimismo, en los sitios activos debe depositarse suficiente producto final para que se haga visible. Los tejidos fijados en formol retiene unaalta proporción de su actividad enzimática de 24 horas. algunas sales metálicas se precipitan como resultado de la actividad y son excelentes para la microscopia. La mayoría de estas técnicas se basan en la formación de sales de plomo insoluble .

Autorradiografia: es un método citoquímico en el que se estudia la localización de los constituyentes químicos de los tejidos registrando la posicióndel material radiactivo incorporado en la muestra. Un espécimen fino que contiene material radiactivo se cubre con una capa delgada de emulsión fotográfica y se guarda en la oscuridad durante semanas o meses. La radiación ionizaste emitida durante la descomposición de la sustancia radiactiva produce imágenes latentes en la emulsión y después del revelado la imagen tiene aspecto de granos de plataen el microscopio electrónico.
JUNIOR
BLANCA
Preparaciones para examen con el microscopio de campo luminoso.
A fin de proporcionar un material adecuado para el examen microscópico se sigue dos técnicas generales.
▪ Una de ellas es la suspención de organismos en un líquido.
▪ Y la otra hace uso de películas o frotes desecados, fijos y teñidos de la muestra.
Las técnicas del montaje...