SEPARACION DE PROTEINAS









SEPARACIÓN DE PROTEÍNAS
Se basan en las propiedades: tamaño, solubilidad, carga, adsorción y afinidad.
ELECTROFORESIS
Cuando una mezcla de moléculas ionizadas son colocadas en uncampo eléctrico, estas experimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta, así, las moléculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el cátodo (el polo negativo) yaquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el ánodo (el polo positivo).

1) Electroforesis de frente móvil o libre
2) Electroforesis de zona: (convencional)
En papel
En acetato de celulosaEn gel (agarosa, poliacrilamida y almidón)
3) Electroforesis capilar


ELECTROFORESIS DE FRENTE MÓVIL O LIBRE
Las diferentes proteínas se desplazan a velocidades diferentes según sus cargas ycoeficientes de fricción respectivos, formándose nubes que se van desplazando en la disolución tampón y que puede seguirse con diversos sistemas ópticos, poniéndose de manifiesto las sustancias que sevan separando tiene poco poder de resolución.












ELECTROFORESIS DE ZONA










ELECTROFERESIS CAPILAR
Técnica automatizada, ofreciendo resultados reproducibles yprecisos.
Separa cualquier tipo de tamaño: moléculas de alto y bajo PM (al contrario que la convencional, que solo separa moléculas grandes). No requiere el uso de colorantes, ya que las proteínas sedetectan directamente por espectrofotometría.
Resolución muy elevada. La velocidad de separación es mucho mayor que en la convencional.









CROMATOGRAFÍA
La cromatografía comprendeun grupo de técnicas de separación basada en la interacción de los componentes de una mezcla con dos medios de características físico-químicas diferentes.
En una cromatografía se pueden distinguirdos elementos: uno estático llamado fase estacionaria y otro fluyente llamado fase móvil.
Los componentes de una mezcla se desplazan por el sistema cromatográfico, arrastrados por la fase móvil y...