Solubilidad De Proteinas

SOLUBILIDAD DE LAS PROTEÍNAS DEL HUEVO
1. OBJETIVOS:
* Observar las distintas reacciones de las proteínas de la clara de huevo disuelta en agua ante la adición de solventes.
* Clasificar las proteínas de la clara para su posterior aplicación a la industria.

2. FUNDAMENTO:
El método de basa en la capacidad de solubilización de las proteínas ante la adición de sales, como detipo metálico, que tienen la propiedad de formar agregado con las proteínas. Ejemplo: Coágulos

3. MARCO TEÓRICO:

4. PARTE EXPERIMENTAL:
a) DESARROLLO DE LA EXPERIENCIA
MATERIALES
* Huevo
* Tubos de ensayo
* Beakers
* Bagueta
* Pipetas
* Piscetas
* Pinza de tubo
* Bombilla
* Mechero
* Rejilla de asbesto Soporte metálico

REACTIVOS(Soluciones de):
* Cloruro de sodio al 10%
* Acetato de plomo (saturada)
* Ácido tricloroacético al 10%
* Sulfato de amonio (saturada)
* Ácido tánico al 5%
* Ácido acético 0,05N
* Ácido clorhídrico (concentrado)
* Ácido sulfosalicílico

METODOLOGÍA
* Separar la clara de la yema.
* Batir ligeramente la clara.
* Diluir la clara agregando4/3 partes de agua.
* Medir el pH.
* Neutralizar con ácido acético 0,05N si es necesario.
* Filtrar.
* Con el filtrado realizar las siguientes operaciones:

a. REACCIONES REVERSIBLES E IRREVERSIBLES
1) Precipitación de albúminas
* Agregar a 5 ml de solución de albúmina, 1,5 g de sulfato de amonio. Agitar enérgicamente hasta disolver la sal.
*Agregar a 5 ml de solución de albúmina, 5 ml de solución de sulfato de amonio saturada.
* Separar por filtración los copos de albúmina formados en cada caso.
* Lavar el precipitado con agua.
* Observar como los copos se disuelven en agua, lo que resulta en una solución con las mismas propiedades que la original.
* El sulfato de amonio provoca la precipitación de la albúmina sinalterar su naturaleza.

1 2) Coagulación de las albúminas
* Colocar en un tubo de ensayo 5 ml de solución de albúmina.
* Separar por filtración los copos.
* Colocar los copos en un beaker y agregar agua.
* Observar que los copos no se disuelven.

b. PRECIPITACION POR ACCION DE IONES PESADOS
* Colocar en un tubo de ensayo 2 ml de solución de albúmina.
* Agregar3 gotas de acetato de plomo saturado. Observar el precipitado (color blanco).
* Agregar NaOH concentrado (1 lenteja).
* Calentar. Observar el precipitado (color negro de SPb).

c. PRECIPITACION POR ACCION DE ACIDOS
Colocar en 4 tubos de ensayo, 2 ml de solución de albúmina y a continuación agregar:
* 4 ml de ácido tricloroacético al 10% (pp. Blanco)
* 4 ml deácido tánico al 5% (pp. Blanco)
* 1 ml de ácido clorhídrico cc (pp. Blanco)
* 4 ml de ácido sulfosalicílico (pp. Violeta)

Los ácidos precipitan las proteínas formando un compuesto insoluble siendo una reacción irreversible.

d. PRECIPITACION POR ALCOHOL
* Colocar en 2 tubos de ensayo, 3 ml de solución de albúmina.
* Agregar a uno de ellos ClNa y luego a los dos (2-3ml).
* La albúmina del tubo que contiene ClNa precipitará mientras que la otra no porque el alcohol necesita la presencia de una sal inorgánica para precipitar la proteína.

EXPERIMENTACIÓN
a. REACCIONES REVERSIBLES E IRREVERSIBLES
1) Precipitación de albúminas


+1.5g sulfato de amonio agitar

5ml albúmina

2)Coagulación de las albúminas


+ H2O

5ml albúmina

b. PRECIPITACION POR ACCION DE IONES PESADOS

Observamos

* Luego agregamos una lenteja de Hidróxido de sodio concentrado (NaOH)cc.

* Para finalizar el experimento calentamos el tubo en baño maría y observamos el resultado.

Se observa una coloración negra en la...