Streptococcus

FAMILIA
* STREPTOCOCCACEAE



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* OBJETIVOS

* El estudiante utilizando las técnicas de cultivo adecuadas, con los medios de cultivo recomendados, identificará todas y cada una de las diferentes cepas deStreptococcus y Enterococcus que se le presenten.

* Estudiará los componentes y fundamentos de cada medio de cultivo utilizado en el aislamiento, pruebas bioquímicas, y susceptibilidad a ciertos antibióticos requeridos para la identificación.

INTRODUCCION

Los miembros de esta familia se caracterizan por ser Cocos Gram Positivos (G+), agrupados predominantemente en cadenas, éstas se observan enforma característica, si el frotis se hace de un cultivo en medio líquido, pues si es de medio sólido pueden observarse todas las agrupaciones (aislados, pares, tétradas).
No producen la enzima catalasa siendo por lo tanto la prueba de catalasa negativa (-), esto es de suma importancia puesto que diferencia a esta familia de la familia Micrococcaceae.
Los géneros de mayor importancia médica sonStreptococcus cuyo hábitat es la piel y mucosas del hombre y el género Enterococcus cuyo hábitat es principalmente el intestino del hombre y los animales.
Streptococcus piogenes son β hemolíticos de un color blanquecino (eritrocitos intactos), Streptococcus agalactiae son β hemolíticos, Streptococcus pneumonie son α hemolíticos de un color verdoso.
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* MATERIAL

1. Cultivo de 24horas, en gelosa sangre inclinada en tubo con tapón de rosca de las diferentes especies de Streptococcus y Enterococcus disponibles en el cepario del Departamento de Microbiología.
2. Optoquina ; Confirma Streptococcus Pneumonie.
3. Placas de gelosa sangre con base de Cassman.
4. Placas de gelosa sangre, con base de Cassman y Azida de Sodio ( inhibe las bacterias Gramnegativas ) al 0.02%.
5. Placas de agar Mueller-Hinton o gelosa soya tripticasa.
6. Tubos con los siguientes medios de cultivo:
* Caldo simple 3 ml.
* Caldo Todd Hewitt 3 ml.
* Caldo cloruro de sodio al 6.5% 3ml.
* Caldo hipurato de sodio al 1% 2ml.
* Agar Bilis Esculina inclinada
7. Discos de Bacitracina de 0.04 µg.
8. Discos de Optoquina(Clorhidrato de etil hidrocupreina) de 10 ug.
9. Discos de Septram (Trimetroprim 1.25 ug. + sulfametroxazole 23.75 ug.)
10. Peróxido de hidrógeno al 3%
11. Cloruro Férrico ácido (Cloruro Férrico 1% en Acido Clorhídrico al 0.25%).
12. Recipientes para incubar en atmósfera parcial de CO2.
13. Candelas blancas.

METODO
* A. AISLAMIENTO Y REALIZACIÓN DE PRUEBAS REQUERIDASPARA LA IDENTIFICACIÓN
1. Sembrar cada cultivo por Frobisher en una placa de:
* Gelosa sangre con base de Cassman
* Gelosa sangre con base de Cassman + azida de sodio (0.02%)
* Incubar a 37° C / CO2 / 24-48 horas.
2. Sembrar cada cultivo por extensión en superficie en una placa de Mueller Hinton o gelosa soya tripticasa y colocar un disco de:
* Bacitracina
*Optoquina
* Septran
3. Incubar a 37°C / 24-48 horas.

4. Sembrar en forma habitual cada cultivo en los siguientes medios de
Cultivo:
* Caldo simple
* Caldo Todd Hewitt
* Caldo cloruro de sodio al 6.5%
* Caldo hipurato de sodio al 1%
* Bilis esculina inclinada
5. Incubar a 37°C / 24-48 horas.

B. LEER E INTERPRETAR LOS RESULTADOS DE LAS PRUEBASANTERIORES.
1. Describir morfología colonial en los medios de A.1.
2. Describir tipo de crecimiento en los medios de caldo simple y Todd Hewitt.
3. Describir morfología celular:
* Medio sólido: En un portaobjetos hacer un frotis de una colonia aislada de Gelosa sangre.
* Medio líquido: Descartar el sobrenadante del cultivo en Todd Hewitt a otro tubo (guardar...