—Tarea de materia microbiologica

Páginas: 17 (4202 palabras) Publicado: 11 de noviembre de 2013
Caldo Uréa (Agar Base)
Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad ureásica.
Se utiliza para identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como Proteus spp., otras enterobacterias y estafilococos. 


Fundamento
En el medio de cultivo, la tripteína y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene elbalance osmótico, y el rojo de fenol es el indicador de pH.
Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa liberando amoníaco y dióxido de carbono. Estos productos alcalinizan el medio haciendo virar el rojo de fenol del amarillo al rojo. En este medio, la fermentación de la glucosa activa la enzima ureasa, acelerando la velocidad del metabolismo en aquellos organismos quehidrolizan lentamente la urea, como especies de Enterobacter o Klebsiella. 
Fórmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Tripteína
1.0
Suspender 24 g de polvo en 950 ml de agua destilada. Dejar reposar 2 minutos. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 50°C y agregar 50 ml de una solución de urea al 40% previamente esterilizada por filtración o cloroformo. Fraccionar en tubos dehemólisis y solidificar en pico de flauta con fondo profundo.
Glucosa
1.0

Cloruro de sodio
5.0

Fosfato monopotásico
2.0

Rojo de fenol
0.012

Agar
15.0

pH final: 6.8 ± 0.2
Siembra
A partir de un cultivo puro de 18-24 horas, estriar la superficie del pico de flauta. Algunos microorganismos pueden requerir mayor tiempo de incubación.
Se recomienda no punzar la capa profundapara controlar el color.

Incubación
En aerobiosis, durante 24-48 horas a 35-37 °C.


Resultados
Microorganismo
Actividad ureásica
Color del medio
Proteus mirabilis ATCC 43071
Positiva
Rojo-Rosado
K. pneumoniae ATCC 700603
Positiva débil
Rojo-Rosado
Escherichia coli ATCC 25922
Negativa
Amarillo
S. flexneri ATCC 12022
Negativa
Amarillo
S. typhimurium ATCC 14028
NegativaAmarillo
Limitaciones
-Bacterias que hidrolizan lentamente la urea, como ser Klebsiella, Enterobacter y Citrobacter, viran al color rojo-rosado de todo el medio de cultivo luego de varios días de incubación.
-No calentar o sobrecalentar el medio de cultivo porque la urea se descompone facilmente.
Características del medio
Medio preparado: amarillo


Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.

Agar Sabouraud Dextrosa (SDA)

Medio utilizado para el aislamiento, identificación y conservación de hongos patógenos y saprófitos. También es útil para el cultivo de levaduras.

Fundamento
Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos, particularmente los asociados con infecciones cutáneas (piel, pelo, etc.). 
En el medio de cultivo,la pluripeptona y la glucosa, son los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El alto contenido de glucosa, la presencia de cloranfenicol y el pH ácido, favorecen el crecimiento de hongos por sobre el de bacterias.
Además, al medio de cultivo, pueden agregarse otros agentes selectivos de crecimiento.
Fórmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Pluripeptona
10.0
Suspender 65 g delpolvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar agitando frecuentemente y hervir 1 minuto hasta disolver. Distribuir y esterilizar 15 minutos a 118-121°C. Mantener en lugar fresco, pues la exposición al calor hidroliza los componentes. Distribuir en placas o en tubos con cierre hermético
 
Glucosa
40.0

Cloranfenicol
0.05

Agar
15.0

pH final:5.6 ± 0.2
Siembra
Depende del uso, puede ser tanto en tubo como en placa. Consultar referencias de métodos recomendados.

Incubación
El tiempo de incubación dependerá del microorganismo que se esté buscando aislar.

Resultados
Microorganismos
Crecimiento
Saccharomyces cerevisiae
Bueno
Aspergillus niger
Bueno
Candida albicans ATCC 10231
Bueno
Características del medio
Medio...
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