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Cromatografía
Definición:
La cromatografía es un método físico de separación en el que los componentes que se han de separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales está en reposo (faseestacionaria, F.E.) mientras que la otra (fase móvil, F.M.) se mueve en una dirección definida.
Otras definiciones (en la web): cronograma, cromatografiar, cromatógrafo, fase ligada, faseinmovilizada, eluir, efluente, muestra, componentes de la muestra, soluto, disolvente, zona.
Otros términos: columna, lecho cromatográfico, empaquetamiento... (véase la sección de nomenclatura).
Hay 3 métodosprincipales de cromatografía: frontal, de desplazamiento y de elución. Sólo consideraremos este último, que es el más habitual, al menos en Bioquímica y Biología Molecular.
Cromatografía plana
Serealiza sobre papel u otro material sólido. Suele llamarse “en capa fina” o “en capa delgada” porque la fase estacionaria recubre un soporte plano y rígido.


Cromatografía ascendente en capa fina:colocación de una muestra (con 3 componentes), desarrollo de la cromatografía y revelado del cromatograma.
 
Rf es el factor de retardo o retraso, que mide la movilidad relativa de cada componentecon respecto al máximo posible, la distancia recorrida por el frente de fase móvil.
Componente 1: Rf = a / D
Componente 2: Rf = b / D 
Componente 3: Rf = c / D

1: aplicación de la muestra 
2: sesumerge el extremo inferior en la fase móvil 
3 a 5: la fase móvil asciende por capilaridad y se va produciendo la separación de los componentes 
6: se marca el frente de avance del disolvente y sedeja secar la placa
7: revelado de los componentes ya separados y medida de su avance
Cromatografía en columna
F.M. líquida, F.E. sólida: columnas de varios mm de diámetro y varios cm de longitud.F.M. gas, F.E. sólida: columnas de unos 5 mm de diámetro y 1-20 m de longitud.
F.M. gas, F.E. líquida: columnas “capilares”, con menor diámetro y 30-100 m (incluso más) de longitud.
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