Tesis

UNIVERSIDAD AUTONOMA METROPOLITANA UNIDAD IZTAPALAPA
DIVISION DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y DE LA SALUD DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGIA

ESTUDIO DEL MECANISMO DE ACCION DEL ABTS Y LA LACASA PARA LA OXIDACION DE COMPUESTOS ORGANICOS

T

E

S

I

S

QUE PARA OBTENER EL GRADO DE

DOCTOR

EN

BIOTECNOLOGIA

PRESENTA

MARIA MYRNA SOLIS OBA

DIRECTOR DE TESIS DR. GUSTAVO VINIEGRAGONZALEZ

México, D. F. 2005.

Junio del

PDF created with pdfFactory trial version www.pdffactory.com

El doctorado en Biotecnología de la Universidad Autónoma Metropolitana está inscrito en el PIFOP, en el marco del PFPN SEPCONACYT

.- 2 -

PDF created with pdfFactory trial version www.pdffactory.com

ESTUDIO DEL MECANISMO DE ACCION DEL ABTS Y LA LACASA PARA LA OXIDACION DECOMPUESTOS ORGANICOS

Comité Tutorial

Director de tesis Doctor Gustavo Viniegra González
Universidad Autónoma Metropolitana- Iztapalapa

Asesor: Doctor Mariano García Garibay
Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa

Asesor: Doctor Eduardo Bázana García
Universidad Nacional Autónoma de México

Comité de Evaluación

Presidente: Dr. Mariano García Garibay
Universidad AutónomaMetropolitana-Iztapalapa _______________

Secretario: Dr. Ignacio González Martínez
Universidad Autónoma Metropolitana-Iztapalapa ________________

Vocal: Dr. Eduardo Bárzana García
Universidad Nacional Autónoma de México _________________

Vocal: Dr. Germán Buitrón Méndez
Universidad Nacional Autónoma de México _________________

.- 3 -

PDF created with pdfFactory trial versionwww.pdffactory.com

A mis tres grandes tesoros Jorge, Irene y Daniel. Gracias por el amor, apoyo y bríos que siempre me han dado

.- 4 -

PDF created with pdfFactory trial version www.pdffactory.com

Agradecimientos
A Dios Por las bendiciones de que me ha colmado. A mis padres Por todo lo que me dieron y enseñaron A mi familia Por todo su apoyo para culminar mis proyectos Al Dr. Gustavo ViniegraPor aceptarme en su grupo de trabajo y por todo lo que me enseñó y apoyó Al Dr. Ignacio González Por permitirme realizar una parte muy importante de mi trabajo en las instalaciones de su laboratorio, por todo lo que me enseñó y por sus valiosos comentarios a mi tesis Al Dr. Victor Ugalde y al Dr. Francisco Villaseñor Por todo lo que me enseñaron Al Dr. Eduardo Bárzana y al Dr. Mariano García Porlos comentarios y sugerencias que me realizaron cada trimestre. Al Dr. Germán Buitrón Por su comentarios que ayudaron a enriquecer mi tesis .Al Dr. Octavio Loera Por su apoyo en todos sentidos. A mis sobrinas Por los ánimos que me brindaron A Lupita, Marisol, Olivia y Rocío Por su amistad y los ánimos que me brindaron A mis compañeros y amigos Gracias por su amistad.

.- 5 -

PDF created withpdfFactory trial version www.pdffactory.com

INDICE Resumen Capítulo I. Introducción 1 4

Capítulo II. Antecedentes 2.1 Lacasa …………………………………………………………………………. 6 2.2 Mediadores…………………………………………………………………….. 8 2.3 Electroquímica………………………………………………………………… 2.4 Uso ambiental de las enzimas………………………………………………. 2.4.1 Colorantes……………………………………………………………… 2.4.2 Mezclilla………………………………………………………………… 2.4.3Fenólicos……………………………………………………………….. 10 11 11 13 14

2.5 Inmovilización de enzimas ………………………………………………...… 14

Capítulo III. Hipótesis y Objetivos Hipótesis……………………………………………………………………………. 16

Objetivo General…………………………………………………………………… 17 Objetivo Específico………………………………………………………………... 17

Capítulo IV. Materiales y Desarrollo Experimental 4.1 Caracterización de la enzima………………………………………………... 4.1.1Purificación de la enzima…………………………………………….. 18 18

4.1.2 Determinación de la actividad de la lacasa…………………………. 19 4.1.3 Determinación del contenido de proteína…………………………… 19 4.1.4 Cálculo de los parámetros cinéticos de la lacasa………………….. 20 4.1.5 Efecto de los disolventes sobre la actividad enzimática…………... 21 4.2 Inmovilización de la enzima ……………………………………………….... 4.2.1 Sistema de inmovilización...