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PRÁCTICA 5
DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES EN SUERO
POR REFRACTOMETRIA
1. Introducción teórica
Cuando una radiación electromagnética alcanza un medio material, el vector campoeléctrico de la radiación
interacciona con los átomos y moléculas del medio, pudiendo dicha radiación ser transmitida, absorbida o
dispersada.
Experimentalmente, se ha observado que la velocidad conque se propaga la radiación a través de una
sustancia transparente, es menor que su velocidad en el vacío y depende además de las especies y
concentración de los átomos, iones o moléculas, perono observándose variación en la frecuencia de la radiación.
Entre los distintos métodos para la determinación del contenido proteico de fluidos biológicos
(fundamentalmente, suero sanguíneo), el derefractometría es uno de los más utilizados, cuando no se precisa
una elevada exactitud.
El índice de refracción del agua a 20º C (n=1.3330) se incrementa con una cierta proporcionalidad con laconcentración de soluto en diluciones acuosas de concentración moderada. Este hecho ha encontrado aplicación
clínica para la determinación rápida del contenido total de proteínas en el suerosanguíneo, para lo cual se parte
del hecho de que prácticamente el índice de refracción de un suero a otro varía en función de su contenido en
proteínas y no difieren entre sí apreciablemente en lo querespecta a solutos, electrolitos u otros metabolitos
simples de carácter orgánico.
Las ventajas de este método radican en la rapidez, mínima cantidad de muestra y facilidad operatoria, si
bien,como queda indicado, su exactitud no es muy elevada, pero cubre correctamente las necesidades clínicas
de carácter rutinario.
El índice de refracción de un medio es, en cierta manera, una medida dela magnitud de dicha interacción, y
se define por:
1
v
c
n =
donde n es el índice de refracción a una frecuencia determinada, v
1
la velocidad de la radiación en el medio
considerado...