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Evaluación interlaboratorio del método para Cuantificación de flavonoides y procianidinas del cacao, contenidas en muestras de chocolate, por HPLC en fase normal con detector de fluorescencia

Se optimizaron y evaluaron los parámetros cuantitativos y funcionales del método para la separación por HPLC en fase normal de los flavonoides y procianidinas en el chocolate y los productos alimenticiosque contienen cacao. El desempeño individual del método de laboratorio se examinó durante tres meses con tres patrones secundarios separados.
RSD (r) varió de 1,9%, 4,5% y 9,0% para las muestras de polvo de cacao, licor y chocolate que contenian 74.39, 15.47 y 1.87mg / g flavanoles y procianidinas, respectivamente.
La precisión se determinó por comparación con el material de referenciaestándar NIST 2384.
La Evaluación inter-laboratorio indico que la variabilidad era bastante baja para siete muestras diferentes que contenian cacao, con un RSD (R) de menos de 10% para la gama de muestras analizadas.
El interés por los flavonoides y procianidinas, especialmente las que se encuentran en el cacao, se ha incrementado sustancialmente en la última década debido a los supuestos beneficiosde salud de estos compuestos presentes en la naturaleza.
Los flavonoles son una subclase de flavonoides. Poseen en general, columna vertebral de carbono C6 - C3-C6 flavonoide y, en particular, el grupo funcional que los distingue consiste en un grupo hidroxilo en la posición 3 en el anillo de centro (oxidación del anillo C ) ( fig. 1 ) . Las procianidinas - una clase específica deproantocianidinas - son las contrapartes oligoméricas de los flavanoles y se componen exclusivamente de loa monómeros de epicatequina y catequina.
Las procianidinas , con mayor frecuencia tienen vínculos carbono-carbono simples - conocidos como procianidinas de tipo B - vínculos entre las subunidades monoméricas . También existen procianidinas doblemente enlazadas y se conocen como tipo A. El peso molecular oel tamaño de un oligómero de procianidina se expresa como su grado de polimerización (DP) y se denominan comúnmente como dímeros , trímeros , tetrámeros , etc
A menudo, debido a la complejidad de su diversidad estructural , metodología analítica para proantocianidinas y procianidinas ha sido separación cromatográfica basado en DP en comparación con los compuestos individuales y los isómerosespecíficos . Este enfoque ha permitido la medición de la gran diversidad estructural de estos compuestos de una manera categórica ( por ejemplo, tamaño oligomérico ) . Específicamente para el cacao y los alimentos que contienen cacao , flavanoles y procianidinas se han cuantificado
El desarrollo de una herramienta de medición robusta, confiable y transferible de flavanoles y procianidinas contenidos enalimentos es necesaria para una evaluación más homogénea, lo que permite apoyar la investigación necesaria para establecer vínculos entre estos componentes de los alimentos y sus supuestos beneficios de salud .
La metodología que se detalla en este documento utiliza un gradiente binario simple y un sistema más ecológico cromatográfico de metodologías anteriores que han analizado con base en DP.Una limitación común en el análisis de estos componentes ha sido la resolución baja para la especie oligomérica mayor - haciendo la cuantificación desafiante. Las condiciones cromatográficas registrados en ellas se modificaron para mejorar la separación inicial entre fracciones oligoméricas.
Condiciones de detección fueron alteradas para así proporcionar una mayor intensidad de la señal(excitación y juego de emisión a 230 y 321 nm, respectivamente). Debido a un aumento de la intensidad de la señal (por un factor de 25, en algunos casos), también se llevó a cabo un gradiente de ganancia, como parte del protocolo de detección , con el fin de tener todas las fracciones dentro del intervalo lineal del detector dentro de una carrera de HPLC . Esto aumentó la intensidad de señal, y una...