vibrio cholerae

Manual de Procedimientos
Aislamiento, identificación y
caracterización de
Vibrio cholerae

2007

Aislamiento, identificación y caracterización de Vibrio cholerae

AUTORES
María Inés Caffer
Raquel Terragno
Sol González Fraga
María Rosa Viñas
Mariana Pichel
Norma Binsztein

Departamento Bacteriología
Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas
A.N.L.I.S. “Dr. Carlos G.Malbrán”
Centro Regional de Referencia del WHO Global Salm Surv
para América del Sur

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Aislamiento, identificación y caracterización de Vibrio cholerae

AISLAMIENTO, IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE
Vibrio cholerae
Este Manual contiene
SECCION I: Introducción
SECCION II: Guía para el Procesamiento de Muestras.
SECCION III: Protocolos para la Identificación y Caracterización de V.cholerae
por métodos fenotípicos
SECCION IV: Protocolos para la Identificación y Caracterización de V. cholerae
por PCR

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Aislamiento, identificación y caracterización de Vibrio cholerae

SECCION I.- INTRODUCCION
El cólera es una de las enfermedades infecciosas que se conocen de más larga data,
existiendo reportes de esta patología desde 1817 (Colwell et al, 1996). El agente
etiológicodel cólera es Vibrio cholerae. Este bacilo Gram negativo, anaerobio facultativo
y móvil, fue descripto por primera vez en 1854 por Pacini en Italia y en 1883 por Robert
Koch. El cólera se ha manifestado como una enfermedad epidémica desde la antigüedad
y las manifestaciones clínicas de la infección varían desde una infección asintomática
hasta una diarrea severa. La patología en su forma mássevera se caracteriza por una
profusa diarrea acuosa (deposiciones como “agua de arroz”), vómitos y deshidratación
con gran pérdida de sales y agua; si no es adecuadamente tratada podría
desencadenarse un shock hipovolémico, acidosis metabólica, falla renal y la muerte.
Estas manifestaciones clínicas fueron atribuidas a la presencia de la toxina de cólera
(CT) en Vibrio cholerae, que fuedemostrada en 1959 por científicos de la India (De SN,
1959). En 1987 se identificó un factor de virulencia adicional, implicado en la adherencia
de V. cholerae a células intestinales que se denominó “toxin coregulated pilus” (TCP)
(Taylor et al., 1987).
En base a diferencias en el antígeno somático “O”, V. cholerae ha sido clasificado en
numerosos serogrupos, siendo reconocidos al menos 200 hastael año 1997 (Yamai et al,
1997). De estos serogrupos, sólo el O1 y, más recientemente, el O139 (Kaper, 1995) han
causado epidemias de cólera. Sin embargo, cepas pertenecientes a serogrupos no-O1,
no-O139, han sido aisladas de pacientes con síntomas que van desde diarrea leve hasta
deshidratación severa semejante a cólera (Levine, 1988). Por otra parte, Vibrio cholerae
no-O1 puede causarinfecciones tales como: apendicitis aguda, colecistitis aguda, otitis
media, celulitis, neumonía, meningoencefalitis y septicemia (Sanyal et al, 1992) Estas
lesiones indicarían que estas cepas podrían tener propiedades invasivas en adición a su
enterotoxicidad.
La mayoría de los aislamientos de serogrupos O1 y O139 producen CT y han sido
asociados con el cólera epidémico, aunque se han aisladoscepas de estos serogrupos

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que no producen dicha toxina y no estuvieron involucrados en epidemias (Faruque, 1998;
Pichel, 2003).

Transmisión del cólera
La infección por V. cholerae es adquirida por la ingestión de agua o alimentos
contaminados consumidos crudos o insuficientemente cocidos. Uno de los tipos de
alimentoinvolucrados son los moluscos bivalvos que se contaminan en el medio marino.
Las almejas, ostras, mejillones se suelen consumir crudos o con un tratamiento de calor
mínimo, en los cuales, V. cholerae puede ser no sólo contaminante de superficie, sino
estar presentes en su tracto intestinal, ya que estas especies son filtradoras y concentran
el microorganismo (Costagliola, 2000).
La...