Espectro de absorciºon de pigmentos

PRÁCTICAS DE FISIOLOGÍA VEGETAL
MEDIDA DE LOS ESPECTROS DE ABSORCIÓN DE CLOROFÍLIDAS Y CAROTENOIDES
1. INTRODUCCIÓN
Para comprender el mecanismo a través del cual los pigmentos del cloroplasto captanla energía
luminosa en el proceso de la fotosíntesis es importante conocer el espectro de absorción de estos
compuestos. Un espectro de absorción es la representación gráfica del grado en el que undeterminado pigmento capta las diferentes longitudes de onda de la radiación luminosa.

% de absorción

Longitud de onda (λ
λ) expresada en nm
Espectro de absorción de los pigmentos fotosintéticos.Imagen tomada de Biology of plants .
Peter H. Raven, Ray F. Evert, Susan E. Eichhorn.. Freeman and Company Worth Publishers. 1999

Las clorofilas presentan dos máximos de absorción, uno en la zona delazul y otro en la zona del
rojo con ligeras diferencias entre clorofila a y clorofila b. Los carotenoides absorben fundamentalmente
las radiaciones azules y violetas.
La exacta localización de losmáximos de absorción depende del disolvente en el que se
encuentren y en esta práctica hay también que considerar que los pigmentos que se utilizan proceden de la
extracción realizada en una prácticaanterior en la que recordemos que lo que se obtenían finalmente eran
clorofílidas. Por último no se deben descartar posibles contaminaciones debido a una no muy buena
separación.
2. MATERIAL
Soluciones depigmentos obtenidos en la práctica de separación mediante disolventes químicos y
conservados en condiciones de oscuridad en el frigorífico.
Espectrofotómetro y cubetas de vidrio
Pipetas de 1 y 5 mlGradilla
Tubos de ensayo
Agua
Éter etílico
Éter de petróleo
Solución de KOH en metanol

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3. METODOLOGÍA
En primer lugar se prepara un blanco para cada uno de los pigmentos con la siguientecomposición.
Clorofílidas. En un tubo de ensayo se mezclan 1ml de solución de KOH al 30% en metanol y 2 ml
de agua destilada y se agita hasta que se mezclen bien
Carotenos. Éter de petróleo
Xantofilas. Éter...