Informe De Enzimas

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO
2012
LABORATORIO DE BIOQUIMICA
Efecto del pH y Temperatura sobre la catalasa

INTEGRANTES:
* Amaya Núñez, Zandibel Clarita (100819B)
* Armillón Alama, Madeleine Maitte (100858H)
* Chafloque Alvites, José Alejandro (100834A)
* Córdova Martel, Rocío Margarita (100830F)
* Pérez Ramón, Carolina Victoria (100849I)
* Olivares Miranda, Lídice Sarith(100861I)

PRACTICA DE LABORATORIO N° 04
EFECTO DEL PH Y TEMPERATURA SOBRE LA CATALASA

* PARTE EXPERIMENTAL

OBJETIVOS
* Determinar la intensidad de reacción de la enzima catalasa o peroxidasa en diferentes tejidos.

* Determinar el efecto del pH, temperatura y concentración de sales sobre la actividad de la catalasa.

MATERIALES Y REACTIVOS MUESTRAS
* Beakers de 100 y 250 mLHígado
* Matraz Erlenmeyer Carne
* Termómetro Papa
* Probeta
* Cuchillos
* Gaza
* Rallador de verdura
* Balanza
* Pipeta
* Mortero con pilón
* Cloruro de sodio
* Agua oxigenada
* Agua destilada

* METODO OPERATIVO

* Realizar un macerado de las muestras con ayuda del mortero y pilón con una adecuada cantidad de agua destilada.

* Con la gazasepare los extractos de las muestras de origen animal y vegetal.

CONDICIONES ESTANDAR
* A cada uno de cuatro tubos de ensayo agregar lo siguiente: a los 3 primeros 5mL del extracto respectivo obtenido (hígado, papa y carne) y al cuarto tubo 5mL de agua destilada.

* A todos los tubos se le añade 2 mL de H2O2 y observar la intensidad de reacción en el momento a temperatura ambiente. Lascaracterísticas observadas me confirman la actividad de la catalasa o peroxidasa sobre el H2O2.

EFECTO TEMPERATURA
* Prepare 5 tubos de ensayo con 5 mL del extracto de origen animal o vegetal donde la reacción fue más intensa.

* Tratar por espacio de 7 minutos cada uno de los tubos de ensayo a la temperatura que le corresponda 40°, 60°, 80°C.

* A todos los tubos, manteniéndole la temperaturarespectiva se le añade 2 mL de H2O2 y observar la intensidad de reacción.

EFECTO PH
* Prepare 3 tubos de ensayo con 5 mL del extracto a la temperatura óptima del tratamiento anterior donde fue mejor la actividad de la catalasa o peroxidasa.

* Al primero agregarle 1 mL de HCl 0.1 M, al segundo 1 mL de agua destilada y al tercero 1mL de NaOH 0.1 M.

* A todos los tubos añadirle 2 mL deH2O2 y observar la intensidad de reacción.

1.- Defina y cite un ejemplo de cada caso: Enzima, coenzima, holoenzima, sustrato, cofactor.
* ENZIMA: Biocatalizadores orgánicos, con estructura de proteína, son producidos en los organismos vivos, elaboradas por las células vivas.
Por ejemplo, las enzimas se utilizan en la fabricación de productos derivados de huevos, las trazas de glucosa, quepodrían oscurecerlos, se eliminan con la acción combinada de dos enzimas, la glucosa-oxidasa y la catalasa. Por otra parte, la papaína y bromelaína, enzimas que rompen las proteínas, se pueden utilizar, fundamentalmente durante el cocinado doméstico, para ablandar la carne.
Algunas enzimas, como la lactoperoxidasa, podrían utilizarse en la conservación de productos lácteos.

* COENZIMA: Soncofactores orgánicos no proteicos, termoestables, que unidos a una apoenzima constituyen la holoenzima o forma catalíticamente activa de la enzima. Tienen en general baja masa molecular (al menos comparada con la apoenzima) y son claves en el mecanismo de catálisis.
Por ejemplo, aceptando o donando electrones o grupos funcionales, que transportan de un enzima a otro como es en el caso de la coenzimaA, que transfiere grupos acetilo (por ejemplo, en la descarboxilación del ácido pirúvico) y de grupos acilo en general.

* HOLOENZIMA: Es una enzima que está constituida por una proteína (apoenzima) y un cofactor, que puede ser un ión o una molécula orgánica compleja unida (grupo prostético) o no (una coenzima). En conclusión, es una enzima completa y activada catalíticamente.
Por ejemplo,...