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Conoce usted los secretos de la coloración de Papanicolaou?
El método Papanicolau para colorear extendidos cervicales es usado desde hace aproximadamente 50 años en todo el mundo. Hay varias marcas comerciales con diferentes performance. Consiste en el uso de un colorante nuclear (hematoxilina) y colorantes citoplasmáticos que compiten entre si permitiendouna tinción policromática

 
Fundamentos
Hematoxilina:
Tiñe a nucleoproteínas ácidas y al moco, por eso es fundamental recordar que la hematoxilina teñirá al ADN y al ARN citoplasmático lo cual le dará una coloración azulada de base azulada a este.
Es el primer colorante de la batería y está en solución acuosa. Las muestras tienen que ser hidratadas antes de ser introducidas en la hematoxilinay luego viradas en agua corriente. El componente activo de la hematoxilina es la hemateína que combinada a metales como el aluminio puede unirse, mediante uniones electrostáticas, a grupos aniónicos del DNA del núcleo y al RNA presentes en el núcleo y citoplasma.
Colorantes citoplasmáticos:   OG6: Orange G, Eosina, Light Green.

Orange G: Es el segundo colorante de la batería y se lo utilizaen solución alcohólica, por lo tanto las muestras tienen que ser bien deshidratas antes de sumergirse en la solución de OG6. Es un colorante proteico ácido de color amarillo-anaranjado. Se utiliza por su capacidad de competir con la eosina y en menor medida con el Light Green. Tiñe principalmente proteínas del citoplasma, y en menor medida al núcleo, sobre todo si este es picnótico. Además puedecolorear eritrocitos, cristales de hemosiderina, cuerpos de asbesto y sobretodo células con citoplasma queratinizado como por ejemplo células paraqueratósicas, coilocitos y células de un carcinoma escamoso poco diferenciado.
Eosina: Tercer colorante que se utiliza también en solución alcohólica por lo tanto la preceden dos o tres cubetas con alcohol 96º para lavado. Se la utiliza junto al LightGreen en lo que se conoce como EA. Es un ácido puro que se une principalmente a proteínas. Existe como monómero que da una coloración rosada a roja o formando dímeros que otorgan una coloración más anaranjada. Utilizado solo, colorea a las células escamosas superficiales de color rojo en forma de monómero  y a los eritrocitos de color naranja en forma de dímeros. También colorea de rojo las proteínasdel nucleolo. A su vez puede teñir en su forma dimerizada todos los componentes que el orange G colorea de amarillo, compitiendo así con este. También puede unirse en forma de monómeros de eosina a los núcleos picnóticos, dando junto con la hematoxilina diferentes tonos de púrpura. Compite con el orange G en eritrocitos y células queratinizadas dando un tinte mixto, amarillento anaranjado. Encambio la competencia con el Light Green es diferente, no existiendo mezcla de colores sino que el citoplasma de cada células se tiñe con eosina monomérica de rojo o con Light Green de verde, dando un patrón en “tablero de ajedrez” Este efecto se ve sobre todo en la infección por HPV por la irregularidad en el proceso de queratinización que el virus provoca. Dado que las moléculas de colorante poseendiferentes tamaños, pueden teñir de manera selectiva grupos de células. De esta manera las moléculas de eosina al ser más pequeñas penetran más fácilmente y tiñen las células del centro del grupo mientras que el Light Green colorea las de la periferia por su mayor tamaño molecular. Las células secadas al aire tienden a colorearse con eosina en vez de Light Green.
Light Green: Es el otrocomponente de la solución EA. Es un colorante ácido que también  posee grupos básicos, es decir que es amfofìlico. El agregado de ácido fosfotúngstico (PTA) le confiere un efecto mordiente, permitiendo la actividad del
colorante en la solución EA a un pH mas alto. A su vez el PTA puede actuar como contrastante  al competir en su unión a proteínas con la eosina.
La competencia de los colorantes Light...