tincion gram

TINCIÓN DE GRAM

1. CONOCIMIENTO TEÓRICO REQUERIDO.-

Debido a que las bacterias y otros microorganismos son muy pequeños, se requieren generalmente tinciones biológicas para visualizarlosadecuadamente y demostrar el fino detalle de sus estructuras internas y su morfología. En la coloración de Gram el Cristal Violeta actúa como colorante primario o básico, que se une a la pared celularbacteriana, luego de un tratamiento con una solución débil de lugol (Mordiente). Algunas especies bacterianas debido a la naturaleza química de sus paredes celulares, poseen la capacidad de retener elcolorante primario o básico (Cristal Violeta), luego de una decoloración con una mezcla de alcohol y acetona o con alcohol al 95 %. Tales bacterias se denominan Gram positivas. Las bacterias Gramnegativas, debido a su mayor contenido lipídico en su pared celular, pierden la coloración primaria (Cristal Violeta) cuando son tratadas con el decolorante y por lo tanto deben tomar el colorante secundarioo de contraste que es la Fucsina o Safranina. Las bacterias Gram negativas aparecen de color rosadas o rojas vistas al microscopio y las bacterias Gram positivas aparecen de color violeta purpúreo.1.1 Fundamento de la coloración de Gram:

Este método divide las bacterias en dos grupos: Gram positivos y Gram negativas. Al colocar los agentes como cristal violeta o violeta de genciana yañadirles una solución lugol, se combinan con algunos componentes de la celular bacteriana que son retenidos por la membrana citoplasmática cuando se tratan con alcohol acetona; otros, en cambio liberanrápidamente el colorante, por lo que no aparecerán a la visión microscópica a no ser que se contrasten con algún otro tinte biológico como safranina o fucsina. Por lo tanto los microorganismos queconservan el cristal violeta o violeta de genciana se observa de violeta Gram positivo y los que no lo hacen Gram negativos muestran un color que corresponde al colorante de contraste de color rosado....