Actividad Enzimatica

Actividad enzimática de la amilasa salival

Resumen

El siguiente trabajo tuvo como finalidad analizar los efectos de la presencia de metales, temperatura y pH sobre la actividad enzimática de la amilasa salival. Para esto se hidrolizaron muestras de almidón variando los rublos mencionados observando en algunos casos la parcial o total inhibición de la enzima y así se lograron identificarlos factores que afectan la actividad enzimática.

Introducción
La amilasa es una enzima hidrolasa que tiene la función de catalizar la degradación del almidón. El almidón está formado por dos tipos de moléculas: la amilosa y la amilopectina, ambos polisacáridos de glucosa. La amilosa se conforma por cadenas lineales de glucosa unidas por enlaces α-(1-4), mientras que la amilopectina tiene,además de estos últimos enlaces, uniones (1-6), formando cadenas ramificadas. La α-amilasa rompe solo las uniones (1-4), tanto en la amilosa como en la amilopectina, dejando dextrinas lineales y ramificadas (oligosacáridos) como producto.
La α-Amilosa se produce principalmente en las glándulas salivares (sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene actividad enzimática a un pH de7. Cuando una de estas glándulas se inflama, como en la pancreatitis, aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre (amilasemia).
Clasificación
α-Amilasa
Las amilasas son enzimas dependientes de cloruro, completamente afuncionales en ausencia de iones de cloruro. Actúan a lo largo de cualquier punto de la cadena de los carbohidratos, descomponiéndolos en dextrina desdela amilopectina. Dado que puede actuar en cualquier punto de la cadena es más rápida que la β-amilasa. En los animales es una enzima digestiva mayor y su pH óptimo está entre 6.7 y 7.2.
β-Amilasa
Otra forma de amilasa, la β-amilasa es también sintetizada por bacterias, hongos y plantas. Actúa desde el extremo no reductor de la cadena, catalizando la hidrólisis del segundo enlace α-1,4, rompiendodos unidades de glucosa (maltosa) a la vez, detiene su acción a distancia de 2 unidades de glucosa antes de atacar las uniones alfa-1,6.Tiene un pH óptimo de 4 - 5.
γ-Amilasa
Además de romper el último enlace α(1-4)glucosídico en el extremo no reductor de la cadena de amilosa y amilopectina, liberando glucosa, la γ-amilasa puede romper los enlaces glicosídicos α(1-6). A diferencia de las otrasamilasas esta forma es más eficaz en medios ácidos y su pH óptimo es de 3.
Inhibición enzimática
Las sustancias que disminuyen de forma específica la velocidad de las reacciones enzimáticas se denominan inhibidores. Estos se han clasificado como competitivos o no competitivos.
Un inhibidor competitivo es un compuesto que compite con un sustrato por el sitio activo de la enzima. Tal inhibidor escasi siempre similar estructuralmente al sustrato y, por imitación, se fija a la enzima impidiendo su actividad catalítica.
Por otro lado, la inhibición no competitiva se caracteriza. Generalmente por una inhibición de la actividad enzimática debida a compuestos que no poseen relación estructural con el sustrato. Estos inhibidores no pueden reaccionar con el sitio activo sino que se fijan enotro zona de la enzima o del complejo enzima sustrato.
La inhibición de la actividad enzimática por iones de metales pesados es un ejemplo típico de la inhibición no competitiva reversible. Los metales pesados forman mercaptidos con los grupos sulfhidrilo (-SH) de las encimas y el equilibrio que se establece inactiva la enzima, que requiere un grupo sulfhidrilo libre para su actividad.

Efectodel pH sobre la actividad enzimática
Sabiendo que las enzimas son proteínas, cualquier cambio brusco de pH puede alterar el carácter iónico de los grupos amino y carboxilo en la superficie proteica, afectando así las propiedades catalíticas de una enzima. A pH alto o bajo se puede producir la desnaturalización de la enzima y en consecuencia su inactivación. La α-Amilasa es más activa a pH tiene...