ADN RECOMBINANTE

ADN RECOMBINANTE

Definición
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Molécula de ADN artificial formada de
manera deliberada in vitro por la unión
de secuencias de ADN provenientes de
dos organismos de especies diferentes
quenormalmente no se encuentran juntos.

Tecnología del ADN recombinante
Permite obtener fragmentos de ADN en
cantidades ilimitadas, que llevará además
el gen o los genes que se desee. Este ADNpuede incorporarse a las células de otros
organismos (vegetales, animales, bacterias...) en
los que se podrá "expresar" la información de
dichos genes.

Procedimiento
1. Corte especifico del ADN(Enzimas de restricción)

Electroforesis: Se prepara una mezcla de fragmentos
de ADN y se ponen en distintas soluciones. Los
fragmentos se desplazan en relación inversa con su
tamaño, losfragmentos más pequeños se mueven
rápidamente, mientras que los grandes lo hacen muy
lentamente.

2. Inserción de fragmentos (vectores de clonado,
pueden utilizarse plásmidos y virus)
Plásmidos:La unión del ADN que
contiene el gen que se
desea clonar con
el vector de clonación, se
realiza por medio de
otras enzimas,
denominadas ADNligasas, que unen ambos
trozos de ADN.

Virus: (Bacteriófagos)



Nota: Los vectores de clonación deben contener
otros genes denominados marcadores que sirven
para identificar las células que contienen el vector
de clonación. Se suelenutilizar como marcadores,
genes de resistencia a antibióticos y genes de
bioluminiscencia.

3. Introducción del Vector
Existen varios métodos a utilizar pero eso depende
del tipo de célula.
Enbacterias
• Método de transformación

•

Transducción

4. Clonación del ADN
Una vez que se ha conseguido la población de
bacterias transformadas ( aquellas que sobrevivieron)
se colocan enun medio de cultivo apropiado para
que se multipliquen. El resultado es que se obtiene un
clon con todo un gen de interés.

Aplicaciones
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Ampliamente utilizada en el campo de la...