Artes

 Hemoglobina
Objetivo:
Determinar la concentración de hemoglobina, que contiene una muestra de sangre problema, por el método de la cianometahemoglobina.
Fundamento:
La hemoglobina de la sangre problema es transformada en cianometahemoglobina por la adición de ferrocianuro de potasio y cianuro de potasio (o de sodio). El ferrocianuro convierte al Hierroferroso de la Hemoglobina en férrico para metahemoglobina, la cual se combina con el cianuro de potasio para formar la cianometahemoglobina estable.
La densidad del color producido es proporcional a la cantidad de hemoglobina presente en la muestra.
Introducción:
La hemoglobina es una medida indirecta de la capacidad de transporte de oxigeno de la sangre. La sangre se diluye en líquido deDrabkin, que destruye los eritrocitos y convierte la hemoglobina en cianometahemoglobina. La solución que se produce se examina por medio de un espectrofotómetro o un colorímetro. Su grado de absorbancia es proporcional a la cantidad de hemoglobina que contenga la sangre. El método fotoeléctrico de la cianometahemoglobina permite hacer los cálculos más precisos de la cantidad de hemoglobina existenteLa hemoglobina es una proteína tetrámera, que consiste de cuatro cadenas polipeptídicas con estructuras primarias diferentes. La hemoglobina presente en los adultos (HbA) tiene dos cadenas α y dos cadenas β. La cadena α consiste de 141 aminoácidos y una secuencia específica, mientras que la cadena β consiste de 146 aminoácidos con una estructura primaria diferente. Estas cadenas son codificadaspor genes diferentes y tienen estructuras primarias diferentes. En el caso de las cadenas δ y γ de otros tipos de hemoglobina humana, como la hemoglobina fetal (HbF) es muy similar a la cadena β. La estructura tetrámera de los tipos comunes de hemoglobina humana son las siguientes: HbA1 tiene α2β2, HbF tiene α2γ2 y HbA2 (tipo menos común en los adultos) tiene α2δ2. Las cadenas α y β de lahemoglobina tienen un 75% de hélices alfa como estructura secundaria, con 7 y 8 segmentos respectivamente. Cada cadena polipeptídica de la hemoglobina está unida a un grupo hemo para formar una subunidad. Las cuatro subunidades de la hemoglobina en su estructura cuaternaria forman un tetraedro. Y sus subunidades se unen entre ellas por puentes de sal, que estabilizan su estructura.
Material:Equipo:
- Hemacitometro - Espectrofotómetro
- Gradillas Reactivo:
- Tubos de ensaye - Reactivo de Drabkin
Muestra:
Sangre venosa
Desarrollo:- Colocar en un tubo de ensaye 5ml de reactivo de Drabkin
- Homogenizar bien la sangre
- Llenar la pipeta de Shally hasta la marca
- Mezclar la sangre con el disolvente
- Dejar reposar 10 min
- Leer a 540 nanómetros en el espectrofotómetro contra el blanco de reactivo
-Absorbancia o el % de transmitancia


Cuenta de eritrocitos
Objetivo:Aprender a realizar un recuento de Eritrocitos por milímetro cúbico de sangre, interpretar el resultado, así como aprender el manejo de la cámara de Neubauer y la pipeta de Thoma
Fundamento:
El número de eritrocitos contenidos en un litro de sangre se denomina concentración de número de eritrocitos.
.Los eritrocitos se diluyen por medio del líquido para diluir eritrocitos.
Los eritrocitos secuentan con el microscopio en una cámara para recuento y se calcula el número por litro.
Introducción:
Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas microscópicas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión como el porcentaje de éstas que son viables.
Para determinar la densidad de las células se...