bacterias
Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad ureásica.
Se utiliza para identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como Proteusspp., otras enterobacterias y estafilococos.
Fundamento
En el medio de cultivo, la tripteína y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodiomantiene el balance osmótico, y el rojo de fenol es el indicador de pH.
Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa liberando amoníaco y dióxido de carbono. Estos productosalcalinizan el medio haciendo virar el rojo de fenol del amarillo al rojo. En este medio, la fermentación de la glucosa activa la enzima ureasa, acelerando la velocidad del metabolismo en aquellos organismosque hidrolizan lentamente la urea, como especies de Enterobacter o Klebsiella.
Fórmula (en gramos por litro)
Instrucciones
Tripteína
1.0
Suspender 24 g de polvo en 950 ml deagua destilada. Dejar reposar 2 minutos. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 50°C y agregar 50 ml de una solución de urea al 40% previamente esterilizada por filtración ocloroformo. Fraccionar en tubos de hemólisis y solidificar en pico de flauta con fondo profundo.
Glucosa
1.0
Cloruro de sodio
5.0
Fosfato monopotásico
2.0
Rojo de fenol0.012
Agar
15.0
pH final: 6.8 ± 0.2
Siembra
A partir de un cultivo puro de 18-24 horas, estriar la superficie del pico de flauta. Algunos microorganismos pueden requerir mayor tiempode incubación.
Se recomienda no punzar la capa profunda para controlar el color.
Incubación
En aerobiosis, durante 24-48 horas a 35-37 °C.
Resultados
Microorganismo
Actividadureásica
Color del medio
Proteus mirabilis ATCC 43071
Positiva
Rojo-Rosado
K. pneumoniae ATCC 700603
Positiva débil
Rojo-Rosado
Escherichia coli ATCC 25922...
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