biologia

LABORATORIO “EXTRACCION DEL ADN”









MARCELA BEDOYA GONZALEZ
LUISA FERNANDA GUEVARA ZUÑIGA
ANA MARIA MURILLO URREA









USC- PALMIRA
SEMESTRE III
2013 B

LABORATORIO “EXTRACCION DEL ADN”









MARCELA BEDOYA GONZALEZ
LUISA FERNANDA GUEVARA ZUÑIGA
ANA MARIA MURILLO URREA



TRABAJO PRESENTADO A NATALI VALENTINA PAYARES
EN EL CURSO DEBIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR II



USC- PALMIRA
SEMESTRE III
2013 B
INTRODUCCION
Los ácidos nucleicos tienen como principales funciones la transmisión y expresión de la información genética. A través de estas funciones determinan no solo la estructura sino que también regulan todos los procesos fisiológicos y metabólicos de los seres vivos. Existen dos tipos de ácidos nucleicos, denominados ácidodesoxirribonucleico (ADN) y ácido ribonucleico (ARN), estos compuestos son polímeros de nucleótidos, los cuales a su vez se conforman de tres moléculas diferentes (azúcar pentosa, base nitrogenada y fosfato).
El estudio de la estructura y propiedades de los ácidos nucleicos ha permitido la comprensión de procesos asociados a mecanismos de enfermedades genéticas e infecciosas, respuesta inmune,desarrollo de células cancerosas y resistencia a antibióticos, los cuales han sido empleados en una serie de campos de la salud. El análisis de la secuencia de los ácidos nucleicos así como el desarrollo tecnológico de sus procesos, han sido la base para el diseño de vacunas, producción de fármacos, mejoramiento de la calidad nutricional de especies vegetales y animales, resistencia vegetal aplagas, control de enfermedades parasitarias, terapia y regulación génica.


OBJETIVOS

1. Realizar la extracción de ADN a partir de células humanas de la mucosa bucal
2. Analizar la importancia de la extracción de ADN en la investigación en salud humana.
3. Analizar el efecto de los diferentes compuestos empleados en la técnica sobre la estructura y propiedades de los ácidos nucleicos.
4.Determinar la utilidad de la técnica de electroforesis en la observación y separación de la molécula de ADN.
5. Analizar la utilidad de la tinción de ADN en su observación.



RESPUESTAS DEL CUESTIONARIO DE ACIDOS NUCLEICOS
1.

2) Explique la función o fundamento de los siguientes reactivos en la extracción de ADN:

a) El SDS: En los laboratorios, el SDS se emplea comúnmente en lapreparación de proteínas para electroforesis en gel de poliacrilamida(SDS-PAGE). El SDS actúa rompiendo enlaces no covalentes en las proteínas, desnaturalizándolas, provocando que estas moléculas proteicas pierdan su conformación nativa. Esto ocurre porque el SDS se une a las zonas apolares del polipéptido. Además, la cantidad de SDS unido es similar para muchas proteínas: una molécula de SDS por cada dosresiduosaminoácidos, correspondiendo a unos 1,4 g SDS/g proteína. Ello proporciona al polipéptido una carga negativa que resulta proporcional a la longitud de la cadena (el número de aminoácidos) y, por tanto, a la masa molecular de la proteína. Este aporte de carga negativa es sustancialmente mayor que la carga original de la proteína. La repulsión electrostática creada por la unión del SDS a laproteína es uno de las causas de que la proteína pierda su conformación nativa, eliminándose de este modo las diferencias en conformación de las diferentes proteínas que han de ser separadas en el gel.
Aunque el SDS se conocía también como SLS, existe una importante diferencia entre ambos. El SDS tiene cadena ramificada, de ahí su desuso actual en detergentes dado que la degradación de cadenaslineales es mucho más efectiva. De hecho, el cambio del SDS por el SLS ha contribuido eficazmente (aunque no ha puesto fin) al problema medioambiental que provocan los detergentes.


b) El cloruro de sodio
en la extracción de ADN se utiliza cloruro de sodio o acetato de sodio para que los iones sodios (Na+) interaccionen con los grupos fosfato cargados negativamente del ADN. De esta forma...