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Análisis Microbiológico de Muestras | |
|AGUA Y LECHE |
|Bacterias coliformes|

Método de los tubos múltiples ( NMP = número más probable )
A. Fundamento
Determinación del número de coliformes mediante siembra de distintosvolúmenes del agua a analizar en series de tubos con caldo lactosado y resiembra en medios de cultivo selectivos incubando a temperaturas adecuadas.

El procedimiento comprende las pruebas: presuntiva, deconfirmación de coliformes totales y de confirmación de coliformes fecales. [pic]
B. Medios de cultivo
- Caldo lactosado
- Agar- lactosa- eosina- azul de metileno ( EMB , Medio de Teague- Levine )- Medio líquido lactosado con sales biliares y fosfatos ( EC , Medio Hajna- Perry )
[pic]C. Procedimiento prueba presuntiva
Es un procedimiento de criba en el que una reacción negativaexcluye la presencia del grupo coliforme y una reacción positiva indica su posible presencia.

Técnica:

Disponer en gradilla una serie de tubos y -en su caso- frascos con caldo lactosadosimple y doble concentrado, según la tabla de NMP que se haya elegido. Mediante pipetas estériles, sembrar los tubos de la serie tomando los volúmenes del agua, homogeneizada, que se indican en latabla. Homogeneizar los tubos sembrados. Incubar a 37°C (± 1°C ) durante 24 h (± 2 h) y, en su caso, hasta 48 h (± 3 h) .

Lectura e interpretación:

Se consideran tubos positivos aquellosen los que se observa enturbiamiento, acidez (detectada por un indicador colocado en el medio) y aparición de gas en la campana de fermentación, independientemente de su cantidad.

Laproducción de gas se pone también de manifiesto por el desprendimiento de pequeñas burbujas que atraviesan el medio al agitar suavemente el tubo.

La ausencia del gas al cabo de 48 h (± 3 h ) se...
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