Ciencias forenses
Páginas: 14 (3380 palabras)
Publicado: 12 de septiembre de 2012
TECNICA DE LA BENCIDINA O DE ADLER
1. Preparación del reactivo
a) Solución de Bencidina
0.25 gr de bencidina se disuelven en 175 ml de etanol y se añaden de 5 a 10 gotas de ácido acético glacial. Se guarda en un frasco gotero ámbar, en refrigeración mientras no se usa.
b) Peróxido de hidrógeno al 3%, en frasco gotero ámbar.
1. Procedimiento
Humedecer un hisopo con agua destilada yfrotarlo sobre la mancha problema.
Añadir al hisopo 1 o 2 gotas de solución de bencidina, después de unos momentos de observar que no dé coloración con ésta, poner la misma cantidad de peróxido de hidrógeno sobre el hisopo.
1. Interpretación de resultados
En caso positivo aparecerá una coloración azul intenso.
TÉCNICA DE FENOLFTALEÍNA
1. Preparación del reactivo
a) Solución deFenolftaleína
Fenolftaleína 2 gr
Hidróxido de potasio 20 gr
Agua destilada 100 ml
Polvo de zinc 20 gr
Disolver estas sustancias y colocarlas a reflujo con el polvo de zinc hasta completar decoloración. Esta solución madre deberá guardarse en un frasco ámbar en refrigeración y deberá añadirse polvo de zinc.
b) Solución de trabajo
Diluír la solución madre en etanol en la proporción de 1:5,la que también deberá refrigerarse mientras no se use.
c) Solución de peróxido de hidrógeno al 3%.
2. Procedimiento
Humedecer un hisopo con agua destilada, frotarlo sobre la mancha problema y pasarlo a un tubo de ensayo con 2 ml de la misma solución, calentar un minuto a 100 °C, añadir unas gotas de solución de trabajo, esperar unos segundos y agregar agua oxigenada.
1. Interpretaciónde resultados
En caso positivo aparecerá una coloración rosa brillante.
TÉCNICA DE LA LEUCO MALAQUITA VERDE
1. Preparación del reactivo
a) Se prepara una mezcla sólida que contenga:
0.32 gr de perborato de sodio y 0.10 gr de malaquita verde, se mezclan perfectamente y se guardan en frasco ámbar. Esta mezcla dura un año sin perder su estabilidad.
b) El solvente se prepara diluyendo6.6 ml de ácido acético glacial en 3.3 ml de agua destilada.
c) Preparar el reactivo de trabajo, inmediatamente antes de usarlo, disolviendo la mezcla sólida a) en la solución b). Si en el reactivo recién preparado llegara a observarse la más leve coloración verde, no deberá ser usado.
2. Procedimiento
La mancha sospechosa se levanta con hisopo humedecido en agua destilada y se leagregan unas gotas del reactivo recientemente preparado.
3. Interpretación de resultados
En caso positivo se observará una coloración verde.
TÉCNICAS ESPECTROSCÓPICAS
En la práctica forense cotidiana en el laboratorio se ha comprobado que una mancha es de sangre con una metodología espectroscópica mucho muy simple y rápida:
1.- Impregnar un pequeño trozo de 5 x 5 mm de tela limpia, sinapresto, de color blanco con la muestra problema.
2.- Colocar la muestra así obtenida en un tubo de ensayo y añadirle 5 ml de agua destilada, dejándola reposar durante 10 minutos para lograr una eficiente extracción: pasado ese tiempo, filtrar.
3.- Efectuar el barrido espectral en la zona del espectro visible; se obtendrán tres bandas de absorción: dos finas a 575 y 540 nm y una banda ancha a412 nm. Este espectro corresponde a la oxihemoglobina.
4.- Efectuar nuevamente la extracción de la muestra problema como se indica en el punto 2, pero utilizando en vez de agua destilada, 5 ml de una solución de ferricianuro de potasio al 0.5%. Al realizar el barrido espectral en la región del visible, se obtendrá una banda a 630 nm, banda que corresponderá a la metahemoglobina.
5.- Sobre lamisma celda de muestra , añadir unos gránulos de cianuro de potasio; al efectuar el barrido espectroscópico, deberá desaparecer la banda de la longitud de onda correspondiente a 630 nm y se obtendrá una banda a 540 nm, debida a la formación de cianometahemoglobina.
NOTA. Para realizar estas experiencias se utiliza un espectrofotómetro Ultravioleta-visible.
TECNICAS DE CONFIRMACIÓN...
1. Preparación del reactivo
a) Solución de Bencidina
0.25 gr de bencidina se disuelven en 175 ml de etanol y se añaden de 5 a 10 gotas de ácido acético glacial. Se guarda en un frasco gotero ámbar, en refrigeración mientras no se usa.
b) Peróxido de hidrógeno al 3%, en frasco gotero ámbar.
1. Procedimiento
Humedecer un hisopo con agua destilada yfrotarlo sobre la mancha problema.
Añadir al hisopo 1 o 2 gotas de solución de bencidina, después de unos momentos de observar que no dé coloración con ésta, poner la misma cantidad de peróxido de hidrógeno sobre el hisopo.
1. Interpretación de resultados
En caso positivo aparecerá una coloración azul intenso.
TÉCNICA DE FENOLFTALEÍNA
1. Preparación del reactivo
a) Solución deFenolftaleína
Fenolftaleína 2 gr
Hidróxido de potasio 20 gr
Agua destilada 100 ml
Polvo de zinc 20 gr
Disolver estas sustancias y colocarlas a reflujo con el polvo de zinc hasta completar decoloración. Esta solución madre deberá guardarse en un frasco ámbar en refrigeración y deberá añadirse polvo de zinc.
b) Solución de trabajo
Diluír la solución madre en etanol en la proporción de 1:5,la que también deberá refrigerarse mientras no se use.
c) Solución de peróxido de hidrógeno al 3%.
2. Procedimiento
Humedecer un hisopo con agua destilada, frotarlo sobre la mancha problema y pasarlo a un tubo de ensayo con 2 ml de la misma solución, calentar un minuto a 100 °C, añadir unas gotas de solución de trabajo, esperar unos segundos y agregar agua oxigenada.
1. Interpretaciónde resultados
En caso positivo aparecerá una coloración rosa brillante.
TÉCNICA DE LA LEUCO MALAQUITA VERDE
1. Preparación del reactivo
a) Se prepara una mezcla sólida que contenga:
0.32 gr de perborato de sodio y 0.10 gr de malaquita verde, se mezclan perfectamente y se guardan en frasco ámbar. Esta mezcla dura un año sin perder su estabilidad.
b) El solvente se prepara diluyendo6.6 ml de ácido acético glacial en 3.3 ml de agua destilada.
c) Preparar el reactivo de trabajo, inmediatamente antes de usarlo, disolviendo la mezcla sólida a) en la solución b). Si en el reactivo recién preparado llegara a observarse la más leve coloración verde, no deberá ser usado.
2. Procedimiento
La mancha sospechosa se levanta con hisopo humedecido en agua destilada y se leagregan unas gotas del reactivo recientemente preparado.
3. Interpretación de resultados
En caso positivo se observará una coloración verde.
TÉCNICAS ESPECTROSCÓPICAS
En la práctica forense cotidiana en el laboratorio se ha comprobado que una mancha es de sangre con una metodología espectroscópica mucho muy simple y rápida:
1.- Impregnar un pequeño trozo de 5 x 5 mm de tela limpia, sinapresto, de color blanco con la muestra problema.
2.- Colocar la muestra así obtenida en un tubo de ensayo y añadirle 5 ml de agua destilada, dejándola reposar durante 10 minutos para lograr una eficiente extracción: pasado ese tiempo, filtrar.
3.- Efectuar el barrido espectral en la zona del espectro visible; se obtendrán tres bandas de absorción: dos finas a 575 y 540 nm y una banda ancha a412 nm. Este espectro corresponde a la oxihemoglobina.
4.- Efectuar nuevamente la extracción de la muestra problema como se indica en el punto 2, pero utilizando en vez de agua destilada, 5 ml de una solución de ferricianuro de potasio al 0.5%. Al realizar el barrido espectral en la región del visible, se obtendrá una banda a 630 nm, banda que corresponderá a la metahemoglobina.
5.- Sobre lamisma celda de muestra , añadir unos gránulos de cianuro de potasio; al efectuar el barrido espectroscópico, deberá desaparecer la banda de la longitud de onda correspondiente a 630 nm y se obtendrá una banda a 540 nm, debida a la formación de cianometahemoglobina.
NOTA. Para realizar estas experiencias se utiliza un espectrofotómetro Ultravioleta-visible.
TECNICAS DE CONFIRMACIÓN...
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