Citocromo-oxidasa

EXPERIMENTO 4
LOCALIZACIÓN Y DEMOSTRACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA CITOCROMO-OXIDASA
OBJETIVO:
Identificar la aparición de la enzima citocromo-oxidasa mediante la adición de alfa naftol ydimetil-para-fenilendiamina.
RESULTADOS

TuboReactivo | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
Alfa naftol al 0.15 % en etanol al 10% | 0.5 | --- | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | --- | 0.5 | 0.5 | 0.5 |Dimetil-para-fenilendiamina al 0.15% | 0.5 | 0.5 | --- | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | --- | 0.5 | 0.5 |
Agua destilada | 1.0 | 1.5 | 1.5 | 2.0 | 0.5 | 1.0 | 1.5 | 1.5 | 2.0 | 0.5 |
KCN 0.01% 10 gotas | ---| --- | --- | --- | 0.5 | --- | --- | --- | --- | 0.5 |
Sobrenadante de hígado | 1.0 | 1.0 | 1.0 | --- | 1.0 | --- | --- | --- | --- | --- |
Suspensión de hígado | --- | --- | --- | --- | --- |1.0 | 1.0 | 1.0 | --- | 1.0 |

Tiempo min. | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
0 | + | --- | --- | + | + | ++ | --- | --- | + | ++ |
10 | + | (Naranja) | (Beige) | + | (Violeta)++ | +++ |(Rojo) | (Naranja) | ++ | ++ |
20 | + | (Naranja) | (Beige) | + | (Violeta)++ | +++ | (Guinda) | (Naranja) | ++ | +++ |
30 | + | (Naranja) | (Beige) | + | (Violeta)++ | ++++ | (Café) | (Naranja) |++ | +++ |

Imagen a los 20 min. en la que se observa una intensificación del azul de indofenol y una coloración azul más concentrada en el tubo 5.
Imagen a los 10 min. en la cual se observa laaparición del azul de indofenol en los tubos 1,4-6,9 y 10.


1) Escriba la reacción de formación del azul de indofenol.

2) Expliquepor qué no se usó vaselina en este experimento.
Porque la vaselina aislaría el oxígeno del azul de indofenol reducido y para la aparición del mismo, la solución debe oxidarse (por acción del O2 delambiente que entra al tubo).

3) Explique sus resultados sobre la base del análisis del contenido de cada tubo.

1. Se observa una coloración azul dispersa, ya que contiene 1 mL de sobrenadante...