Citogenetica

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INDICE

Pág.

1. CITOGENETICA HUMANA 3
2. INTRODUCCION 3
3. CULTIVO DE LINFOCITOS PARA LA OBTENCIÓN DE METAFASES 3
4. TOMA DE MUESTRA 4
1. HEPARINIZACION DE LA JERINGA 4
2. PUNCION VENOSA 4
5. TRANSPORTE Y CONSERVACION DE LA MUESTRA 4
6. TÉCNICA PARA CULTIVO Y PREPARACIÓN CROMOSOMICACULTIVO DE
ALTA RESOLUCIÓN 5
1. SIEMBRA 5
2. COSECHA 6
3. PREPARACIÓN DE LAS LAMINAS PARA EL GOTEO 9
4. GOTEO 10
5. DIAGRAMA 11
7. TÉCNICA DE CULTIVO CONVENCIONAL PARA LA OBTENCIÓN DE
CROMOSOMAS EN METAFASE 12
1. SIEMBRA 12
2. COSECHA 12
3. DIAGRAMA14
8. TÉCNICA DE CULTIVO PARA EXPRESIÓN DEL X FRÁGIL 15
9. TÉCNICA DE CULTIVO PARA INTERCAMBIO DE CROMATIDES HERMANAS
I.C.H. 15
10. TECNICAS DE BANDEO CROMOSOMICO 16
1. BANDAS 16
1. BANDAS R 17
2. COLORACION 19
3. DIAGRAMA 20
2. BANDAS G 21
1. COLORACION 22
3.BANDAS C 22
1. COLORACION 24
4. BANDAS N 24
1. COLORACION 25
5. BANDAS R MODIFICADAS PARA OBTENER INTERCAMBIO DE CROMATIDES HERMANAS (ICH) 26
1. COLORACION 28
2. DIAGRAMA 29
11. COLORACIÓN GIEMSA 30
12. MICROSCOPIA Y FOTOGRAFÍA 30
1. MICROSCOPIA DE CONTRASTE DE FASE 302. MICROSCOPIA DE LUZ TRASMITIDA 30
3. FOTOGRAFIA 31
4. PROCESO DE REVELADO PARA PELICULAS BLANCO Y NEGRO 31
5. PROCESO PARA COPIADO DE PELÍCULAS BLANCO Y NEGRO A PAPEL 32
13. MATERIAL BÁSICO DE LABORATORIO DE CITOGENÉTICA 33
14. CUIDADOS ESPECIALES 34
1. LIMPIEZA Y LAVADO DEL MATERIAL 34
2. ESTERILIDAD DURANTE LA SIEMBRA 3515. PREPARACION DE REACTIVOS 35
1. MEDIOS DE CULTIVO 35
2. SOLUCIÓN DE ANTIBIÓTICOS 35
3. FITOHEMAGLUTININA 36
4. COLCHICINA 37
5. SOLUCIÓN HIPOTÓNICA 37
6. COLORANTE GIEMSA 38
7. TAMPÓN GIEMSA PH 6.8 38
8. SOLUCIÓN SALINA CITRATADA ( 2 x SSC) 40
9. TRIPSINA 41
10.BROMODESOXIURIDINA 41
11. TAMPÓN GIEMSA PH 7.2 44
16. GLOSARIO 47
17. BIBLIOGRAFIA 51

1. CITOGENETICA HUMANA

2. INTRODUCCIÓN

La citogenética es reconocida hoy por hoy como una ciencia que va a la vanguardia en el perfeccionamiento de sus técnicas y procedimientos, para consolidarse como la herramienta básica en el diagnóstico de lasdiferentes anormalidades cromosòmicas.

El propósito de este manual es orientar y servir de consulta a quienes trabajan en el Laboratorio de Genética, en èl se mencionan las diferentes técnicas de cultivo de linfocitos, los componentes y su importancia para el proceso, especificaciones de la muestra y todas las etapas seguidas para obtener un diagnostico útil para el medico genetista, pero sobretodopara la salud del paciente.

3. CULTIVO DE LINFOCITOS PARA LA OBTENCIÓN DE METAFASES

En estos cultivos las células crecen libres en el medio, sin adherirse a las paredes del recipiente en que se encuentran. Las condiciones de cultivo varían de acuerdo al tipo de anomalía sospechada y a las características que se deseen observar. Se pueden utilizar diferentes clases de medio, los másapropiados incluyen: RPMI 1640, Medio Esencial Mínimo (MEM) y medio TC 199; a los cuales se les adiciona suero fetal bovino (SFB) inactivado, que proporciona enriquecimiento al medio; como estimulante mitogènico se adiciona fitohemaglutinina (PHA). La PHA es una sustancia que se obtiene de las semillas del fríjol ( Phaseolus vulgaris ) ; provoca la aglutinación de los hematíes y la estimulación de los...
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