Coliformes fecales (nmp)

PRÁCTICA:

_____“COLIFORMES FECALES POR EL NUMERO MAS PROBABLE (NMP)”____

OBJETIVO:
Determinar la contaminación de origen fecal existente en leche cruda.

INTRODUCCION:
Los coliformesfecales son un grupo de microorganismos en que Escherichia coli organismo de origen fecal, representa una elevada proporción. Su identificación se basa en la fermentación de la lactosa con formación degas en medios selectivos incubados a una temperatura estrictamente controlada.
Su empleo como indicador de contaminación fecal tiene muchas limitaciones, ya que su presencia no puede interpretarsede la misma manera en todos los alimentos. Su cuantificación está supeditada a diversas condiciones, entre las que destacan su reproducción o destrucción en los diferentes tipos de alimentos. En todoslos casos, su hallazgo indica un cierto grado de riesgo, pero no existe correlación absoluta entre presencia y la de microorganismos patógenos entéricos.

MATERIAL:

 Medios de cultivo: CaldoLactosa Bilis Verde Brillante.
 Probeta 100ml.
 10 tubos de ensaye con tapón.
 Pipeta de 10 y 1 ml.
 1 Matraz de 250 ml.
 Balanza granataria.
 Espátula.
 Mechero.
 Tripie.
 Olla depresión.
 Estufa de cultivo.
 Papel aluminio.
 Algodón.
 Gasa.
 Cinta.
 Agua destilada estéril.
 2 franelas.
 Alcohol para desinfectar.
 Muestra de leche fresca.
 Campana Durham.
Muestra: LF de vaca y cabra.

METODOLOGIA:

1. Esterilizar todo el material que estará en contacto con la muestra.

2. Trabajar bajo condiciones asépticas cerca del mechero.

3. Preparar elmedio de cultivo (Caldo Lactosa Bilis Verde Brillante.) para los tubos de ensaye.

4. En el matraz diluir 13 gr. de medio de cultivo en 95 ml de agua destilada.

5. Calentar con agitación suave hastasu completa disolución y hervir durante un minuto.

6. Vaciar en los tubos de ensaye 10 ml del medio de cultivo, colocar la campana Durham y cerrarlo.

7. Esterilizar en autoclave a 121ºC (15...