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ESPECTROFOTOMETRIA
La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones químicas y biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar laradiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
PRINCIPIO
Todas las sustancias puedenabsorber energía radiante, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe radiación de longitudes de ondas que no pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en laregión del infrarrojo. La absorción de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las moléculas, y es característica para cada sustancia química. Cuando la luzatraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; la energía radiante no puede producir ningún efecto sin ser absorbida.
Además, no está de más mencionar el hecho de que la absorción y trasmitanciade luz depende tanto de la cantidad de la concentración como de la distancia recorrida.
Ley de Beer
La Ley de Beer declara que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende de la concentraciónen la solución. Por ejemplo, en un vaso de vidrio tenemos agua con azúcar diluida y en otro vaso tenemos la misma cantidad de agua pero con más azúcar diluida. El detector es una celda fotoeléctrica,y la solución de azúcar es la que se mide en su concentración. Según la ley de Beer, si hiciéramos que un rayo de luz atravesara el primer vaso, la cantidad de luz que saldría del otro lado seriamayor que si repitiéramos esto en el segundo; ya que en el segundo, las ondas electromagnéticas chocan contra un mayor número de átomos o/y moléculas y son absorbidos por estos.
Ley de Lambert
En laLey de Lambert se dice que la cantidad de luz absorbida por un objeto depende de la distancia recorrida por la luz. Por ejemplo, retomando el ejemplo de los vasos, pero ahora, pensemos que ambos...
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