Cromatografía en capa fina y columna

Laboratorio de Química Orgánica I

Práctica 3
Cromatografía en capa fina y en columna

Miércoles 1 de Septiembre de 2010

INTRODUCCIÓN:
La cromatografía es un método de separación de especies distintas que se basa en la distribución diferencial de una mezcla entre una fase estacionaria fija y una fase que se mueve a contracorriente respecto a la primera. De este modo se producentransferencias repetidas de los componentes de una mezcla, muchas veces entre las dos fases, lo cual conduce a su separación. La fase estacionaria puede ser la superficie de un soporte sólido situado en una columna o un líquido mantenido en un soporte sólido, mientras que la fase que se desplaza es un líquido o un gas.
Existen varios métodos de los cuales veremos: de capa fina y en columna.
Elmétodo de capa fina consiste en hacer uso de una capa plana relativamente fina con la cual no se necesita soporte o una superficie recubierta. La fase móvil se mueve a través de la fase estacionaria por capilaridad, en ocasiones ayudada por acción de la gravedad o de un potencial eléctrico. Este tipo de cromatografía tiene como ventajas que el procedimiento es mucho más rápido y de menor costo. Lacromatografía de capa fina es de gran importancia para determinar la pureza de los productos farmacéuticos.
La cromatografía en columna es una variedad de la cromatografía en la que la fase móvil es líquida y pasa a través de la fase estacionaria, sólida o líquida, que está retenida en un recinto cilíndrico.
Los reveladores cromatográficos se utilizan para que se dé una reacción química entre ély los componentes separados, los reveladores más usados son el revelador de yodo y el ácido sulfúrico. La constante RF (Ratio of Front) es simplemente una manera de expresar la posición de un compuesto sobre una placa como una fracción decimal, mide la retención de un componente. Se define como:

OBJETIVO:
a) Observaremos la técnica de cromatografía para separar mezclas decompuestos.
b) A través de ésta técnica lograremos determinar la pureza de sustancias químicas, así como identificarlas.
c) Calcularemos los factores de RF de las sustancias que emplearemos.
d) Al tener los factores RF, deduciremos la relación entre la polaridad de las sustancias que se analizaran y de los eluyentes utilizados.
e) Se tendrá un criterio de pureza e identificación delas sustancias que se utilicen.

MÉTODO:

FORMACIÓN DE PLACAS CROMATOGRAFICAS:
1.- Lavamos con agua y jabón los portaobjetos y luego los sumergimos en acetona para secarlos.
2.- Hicimos una mezcla espesa revolviendo sílica y acetato de etilo.
3.- Juntamos dos porta objetos y los sumergimos en la mezcla de sílica.
4.- Esperamos que se secaran y luego separamos los portaobjetos.
5.- Conayuda del capilar, pusimos un punto de mezcla problema sobre la cara del portaobjetos con sílica, cerca de un extremo.
6.- Realizamos cuatro soluciones con eluyentes

Eluyente | | Eluyente | |
Hexano : Acetato de Etilo | 08:02 | Hexano : Acetato de Etilo | 05:05 |
Hexano : Acetato de Etilo | 06:04 | Etanol | 100% |
7.- Colocamos poca cantidad de eluyente en un vaso de precipitados.
8.-Pusimos un portaobjetos (con la marca previa en el extremo inferior) y tapamos el vaso de precipitados.
9.- Observamos como el eluyente subía por el portaobjetos.
10.- Realizamos la misma operación con todos los cuatro eluyentes.
11.- En cuanto se secaron los portaobjetos los observamos con la lámpara.
12.- Sacamos el RF mediante la distancia entre la mancha inicial y una de las creadasdespués de aplicar el eluyente y eso dividido entre la distancia total que el eluyente recorrió.
13.- Montamos la torre de cromatografía y con ayuda de una bomba de vacío hicimos que el algodón se fuera hasta debajo de la misma.
14.- Llenamos la torre de cromatografía con la mezcla de sílica.
15.- Con ayuda de una bomba de vacío aplicamos aire a la torre de cromatografía para empacar la...