Cromatografia Papaina
Páginas: 2 (283 palabras)
Publicado: 2 de diciembre de 2012
CROMATOGRAFÍA
¿Que es?
• Es un conjunto de técnicas que permite
identificar , separar y determinar compuestos
químicos en una mezcla.
• Esta técnica puede ser aplicada a gases olíquidos.
Todas las técnicas de cromatografía tienen una
fase estacionaria y una fase móvil.
fases:
– La fija : fase estacionaria
– La móvil: fase móvil fluye permanentementedurante el análisis
Cromatografía de gases: la fase móvil es el gas el
cual se hace pasar por una fase estacionaria
Cromatografía de líquidos la fase móvil es un liquido
(solución) que sehace pasar a través de una fase
estacionaria
Cromatografía de líquidos
Existen dos métodos:
• Cromatografía liquida
clásica: la columna es de
vidrio y se usa para mezclascomplejas
• Cromatografía de alta
resolución (HPLC): la
columna es de acero
inoxidable .
Métodos cromatográficos en HPLC
• Cromatografía por permeabilidad en gel
• Cromatografía deafinidad.
• Cromatografía iónica.
Condiciones
• Intercambio catiónico
• Columna negativa:
– PL-SCX 50X4.6mm
• Solución Buffer a pH=7 fosfatos:
– Fosfato de sodio
– Fosfatodisodico
– Azida de sodio (0.02%)
• Solución salina cloruro de potasio
• Concentración de la solución a purificar 1µg/ml
– 1µg de papaína en 1.5ml de agua
Resultados
MétodoTiempo
%A Buffer pH:7
%B solución salina
0
100
0
5
100
0
10
60
40
20
20
80
25
20
80
30
100
0
35
100
0
Puntoisoeléctrico
PI
Papaína
8.75
quimopapaína
10.1-10.6
proteinasa
11
Señales
• En el pico 1 se observa en el intervalo de
tiempo de (17-20)min representa a la papaína
• En elpico 2 se observa en el intervalo de
tiempo de (23-25)min representa
quimopapaína
• En el pico 3 se observa en el intervalo de
tiempo de (28-31)min representa proteinasa
¿Que es?
• Es un conjunto de técnicas que permite
identificar , separar y determinar compuestos
químicos en una mezcla.
• Esta técnica puede ser aplicada a gases olíquidos.
Todas las técnicas de cromatografía tienen una
fase estacionaria y una fase móvil.
fases:
– La fija : fase estacionaria
– La móvil: fase móvil fluye permanentementedurante el análisis
Cromatografía de gases: la fase móvil es el gas el
cual se hace pasar por una fase estacionaria
Cromatografía de líquidos la fase móvil es un liquido
(solución) que sehace pasar a través de una fase
estacionaria
Cromatografía de líquidos
Existen dos métodos:
• Cromatografía liquida
clásica: la columna es de
vidrio y se usa para mezclascomplejas
• Cromatografía de alta
resolución (HPLC): la
columna es de acero
inoxidable .
Métodos cromatográficos en HPLC
• Cromatografía por permeabilidad en gel
• Cromatografía deafinidad.
• Cromatografía iónica.
Condiciones
• Intercambio catiónico
• Columna negativa:
– PL-SCX 50X4.6mm
• Solución Buffer a pH=7 fosfatos:
– Fosfato de sodio
– Fosfatodisodico
– Azida de sodio (0.02%)
• Solución salina cloruro de potasio
• Concentración de la solución a purificar 1µg/ml
– 1µg de papaína en 1.5ml de agua
Resultados
MétodoTiempo
%A Buffer pH:7
%B solución salina
0
100
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5
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60
40
20
20
80
25
20
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30
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0
35
100
0
Puntoisoeléctrico
PI
Papaína
8.75
quimopapaína
10.1-10.6
proteinasa
11
Señales
• En el pico 1 se observa en el intervalo de
tiempo de (17-20)min representa a la papaína
• En elpico 2 se observa en el intervalo de
tiempo de (23-25)min representa
quimopapaína
• En el pico 3 se observa en el intervalo de
tiempo de (28-31)min representa proteinasa
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