Cultivo de hongos

PRACTICA #1
ELABORACIÓN DE MEDIOS Y CULTIVOS DE HONGOS
INTRODUCCIÓN
El medio de cultivo es una sustancia o solución que permite el desarrollo de microorganismos, mientras que el cultivo es el producto del crecimiento de un organismo. Los medios utilizados en micología deben contener los nutrientes suficientes para asegurar el desarrollo y reproducción de los hongos (carbono, nitrógeno,vitaminas, oligoelementos, etc.) y un pH ligeramente ácido (6 – 6.3) para facilitar su crecimiento e inhibir al mismo tiempo el desarrollo de otros microorganismos.
Existen una gran variedad de medios de cultivo diseñados para propósitos muy específicos, en el caso de los hongos se han desarrollado medios de cultivo específicos para su aislamiento. En el caso de medios sólidos se utiliza agar quesolamente es el soporte, por su difícil degradación el agar es ampliamente utilizado para la preparación de medios sólidos.
PAPA DEXTROSA AGAR (PDA)
Es un medio muy usado que sirve para aislar todo tipo de hongos. Beauveria, Paecilomyces, Lecanicillium (Verticillium) y Metarhizium, los más importantes hongos parásitos de insectos, al igual que los parásitos de plantas y los hongos saprofitoscrecen muy bien y esporulan en este medio.

TECNICA DE LA CINTA ADHESIVA O SCOTCH
Método que puede considerarse como el más simple, económico y adecuado para la identificación de hongos


OBJETIVOS
Conocer algunos medios de cultivo para la propagación de hongos
Aprender a elaborar medios de cultivo (PDA), esterilizar y vaciar el medio en cajas petri.
Cultivar hongos.MATERIALES Y MÉTODOS
Para la elaboración de 1 L de medio PDA se requiere de los siguientes reactivos y materiales.
200 g de papa pelada y picada en cuadros pequeños
300 ml de agua destilada
20 g de dextrosa
15 g de agar agar
1 Balanza granataria
1 parrilla eléctrica
1 Parilla de gas
2 mecheros
1 autoclave
1 Agitador de cristal
1 Vaso de precipitado de 500ml
1 Matraz Erlenmeyer de500ml
4 Sobres de gasa
1 Bolsa chica de algodón
1 Plumón negro permanente
Para preparar 10 cajas petri se necesitan 300ml de agua destilada 200gr para 1 L de papa picada en cuadritos
Para 5 cajas petri se necesitan 150ml de agua destilada y 100gr para 1 L de papa picada se ocupan 3 g de Dextrosa y 4.5 g de Agar las conversiones fueron las siguientes:
DEXTROSAAGAR
20g ------- 1000 ml de agua destilada 15g --------- 1000 ml de agua destilada
3 g -------- 150 ml de agua destilada 4.5g -------- 150 ml de agua destilada

Para el cultivo de hongos se requerirá:
Medios de cultivo PDA en cajas Petri
Cepas fúngicas de los géneros Aspergillus, Peniciullium, Sacharomyces y Rhizopus
1 Asa bacteriológica
2 mecherosPROCEDIMIENTO
1. Hervir 30g de la papa cortada en cubos de 1cm x 1cm, en un vaso de precipitado con 150ml de agua destilada hasta que esté cocida.

2. Usando el matraz de 500ml, disolver el agar en 150ml de agua destilada estéril.

3. Filtrar el caldo con la gasa en el matraz.

4. Añadir al filtrado 3g de dextrosa

5. Disolver con calentamiento y aforar a 300ml con agua destilada

6.Esterilizar en el autoclave

7. Verter en cajas Petri

8. Incubar más de 72 horas para verificar esterilidad de los medios

9. Después de verificar la no existencia de contaminantes se procede a inocular las cajas con las cepas que el profesor proporcione. Rodo esto bajo condiciones asépticas, proporcionada por los mecheros

10. Haga 5 inoculaciones puntuales por caja

11. Incubarde 4 a 6 días con la caja de Petri invertida o hasta la observación de las colonias fúngicas en desarrollo






RESULTADOS
COLOR DEL ANVERSO DE LA COLONIA
COLOR DEL REVERSO DE LA COLONIA
ASPECTO DE LA COLONIA
Verde
Amarillo/ Crema
Colonia plegada
Blanco
Blanco
Colonia algodonosa
Verde
Amarillo fuerte
Colonia plegada
Blanco, gris y bolitas cafes
Beige
Colonia zonada...