Cultivo In Vitro Y Su Relaci N Con La Biotecnolog A
Biotecnología
“Cultivo de tejidos vegetales” es una descripción genérica que involucra diferentes
técnicas de cultivo de protoplastos vegetales, células vegetales, tejidos vegetales, órganos
vegetales y plantas; y mediante el cual es posible obtener plantas libres de microbios en un
medio nutritivo aséptico (estéril) en condiciones ambientales controladas.También se lo
conoce como “cultivo
in vitro de
plantas” por realizarse en recipientes de vidrio (hoy
también de otros materiales).
Esta técnica tiene numerosas aplicaciones:
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Propagación masiva de plantas, especialmente beneficioso para especies de
difícil propagación por otros métodos, o en vías de extinción
Clonación de individuos elite durante todo el año
Obtención deplantas libres de virus
Producción de semillas sintéticas
Conservación de germoplasma
Obtención de metabolitos secundarios
Producción de nuevos híbridos
Mejora genética de plantas
Germinación de semillas.
Producción de haploides.
Estudios fisiológicos diversos.
Como vimos en los cuadernos donde explicamos el proceso de obtención de plantas
transgénicas,
existen distintas técnicas para latransferencia de genes a las
células vegetales. Las dos principales son
Agrobacterium
y la
Biobalística
(explicadas en los cuadernos 18 y 28 respectivamente). Una vez realizada la
transformación genética con alguno de estos dos métodos, el paso siguiente es el
cultivo in vitro:
la
regeneración de plántulas a partir del explanto inicial
transformado, basado en el principio de‘totipotencialidad celular’, que
desarrollaremos en este cuaderno. De aquí la importancia del cultivo in vitro como
paso fundamental para la obtención y regeneración de plantas genéticamente
modificadas. Veamos de qué se trata.
Introducción teórica
La reproducción asexual de plantas por cultivo de tejidos es posible gracias
a que cada una de las células de un individuo vegetal, posee la capacidad
necesariacomo para permitir el crecimiento y desarrollo de un nuevo
individuo, sin que medie ningún tipo de fusión de células sexuales o gametos.
Esta capacidad está dada por la información genética contenida en el ADN
nuclear de cada célula somática y se denomina
totipotencialidad
celular.
Básicamente la reproducción asexual se puede realizar debido a que las
células poseen un mecanismo de divisiónmitótico, mediante el cual, los
vegetales cumplen sucesivas etapas de crecimiento y desarrollo. La división
celular mitótica implica una replicación de los cromosomas de las células
hijas, por lo que las mismas poseen un genotipo idéntico al de la célula
madre.
Así, las células vegetales crecidas en condiciones asépticas sobre medios de cultivo
adicionados con reguladores del crecimiento (tambiénllamados hormonas
vegetales), pueden dividirse dando dos tipos de respuesta:
i.
ii.
una desdiferenciación celular acompañada de crecimiento tumoral, que
da lugar a una masa de células denominada callo, la cual si se crean las
condiciones adecuadas es capaz de generar órganos o embriones
somáticos,
una respuesta morfogenética por la cual o se forman directamente
órganos (organogénesis) o embriones(embriones somáticos).
La primera respuesta se conoce como organogénesis o embriogénesis indirecta
(mediada por un estado de callo) mientras que la segunda respuesta se considera
organogénesis o embriogénesis directa. Cuando el órgano originado es un brote, el
proceso se denomina caulogénesis (directa o indirecta).
Básicamente el cultivo in vitro consiste en tomar una porción de una planta (ápice, hoja, segmento de tallo, meristema, embrión, nudo, semilla, antera,
etc.) y colocarla en un medio nutritivo estéril ( usualmente gelificado,
semisólido) donde se regenerarán una o muchas plantas.
La formulación del medio cambia según se quiera obtener un tejido
desdiferenciado (callo), crecer yemas y raíces, u obtener embriones
somáticos para producir semillas artificiales.
Para lograr...
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