Deel

Tinción GRAM

MATERIAL:
• Portaobjetos: varios
• Agua destilada estéril: 10mL
• Guantes: varios
• Asa bacteriológica
• Mechero de alcohol o gas: uno por mesa
• Rejilla de tinción
•Microscopio: dos por mesa
• Aceite de inmersión para microscopio: uno por mesa

REACTIVOS:
• Cristal violeta
• Lugol
• Alcohol-acetona
• Zafranina

Procedimiento
Procesamiento de la muestraSe toma cuidadosamente el plato de cultivo bacteriano con las manos cubiertas con guantes como forma de evitar contacto directo con el germen cultivado.
Con el asa bacteriológica esterilizada (porflameo), se toma una pequeña muestra del cultivo y se deposita sobre una gota de agua esterilizada en un portaobjetos limpio y debidamente rotulado y se distribuye homogéneamente por la plaquita sindispersarlo mucho o dejarlo muy compacto para luego proceder al proceso de fijación.
Inmediatamente se distribuye el contenido el asa bacteriológica la misma se procede a esterilizar nuevamente previoa su empaquetamiento y almacenaje.
Para fijar la muestra a la plaquita o portaobjetos se procede al proceso de flameo que consiste en tener un mechero de gas o alcohol encendido y pasar elportaobjetos a 2cm de distancia de la flama de manera ondulante hasta que el contenido líquido esté casi seco, luego se deja secar con la temperatura ambiente y finalmente como factor de seguridad para lafijación se vuelve a pasar por el mechero por tres ocasiones sin dejar que se queme el contenido en ningún momento.

Tinción GRAM:

Algoritmo de laboratorio bacterias GRAM positivas



TinciónGRAM
1: Se toma la plaquita fijada con la muestra del cultivo y se procede a cubrirla completamente con cristal violeta por un minuto, luego se elimina el exceso con abundante agua.
2: Con elportaobjetos escurrido se procede a llenarlo con solución de lugol completamente por encima de la muestra fijada por un minuto y luego se elimina el exceso con abundante agua.
3: Se procede entonces a...