DEMOSTRACI N DE LA ACTIVIDAD ENZIM TICA

DEMOSTRACIÓN DE LA ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA
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OBJETIVOS
— Descomponer el agua oxigenada por acción de la peroxidasa.
— Poner de manifiesto la presencia en la saliva de la enzima amilasa,
demostrando suactividad: la hidrólisis del almidón para dar
glucosa y maltosa.

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FUNDAMENTO TEÓRICO
a) Enzima Peroxidasa

Entre las enzimas que poseen las células, se puede poner fácilmente de manifiesto ladenominada
peroxidasa, que se halla siempre presente, tanto en las células vegetales como en las animales.
Esta enzima actúa sobre el agua oxigenada (H2O2) descomponiéndola en agua y oxígeno
molecular quese desprende en burbujas. La reacción es la siguiente: 2 H2O2  2 H2O + O2
La peroxidasa como la mayor parte de las enzimas, es muy sensible al calor, destruyéndose
cuando los tejidos que lo contienenson sometidos a calentamiento.
b) Amilasa de la saliva
La amilasa o ptialina actuando sobre el almidón, desdobla por hidrólisis la molécula liberando
azúcares reductores. La presencia de amilasa sepuede demostrar poniendo de manifiesto su
actividad de estas dos formas:
1. Por la aparición de los productos finales de la hidrólisis del almidón (moléculas de glucosa
y de maltosa). Se tratan deazúcares reductores y se puede detectar su presencia con el
reactivo de Fehling A y B (prueba realizada en la práctica de glúcidos). Además, se puede
detectar su presencia mediante la reacción de Benedict,que es exclusiva de los azúcares
reductores (como la glucosa y la maltosa) y que da como resultado una coloración
característica. Así pues, en esta ocasión vamos a determinar la presencia deglúcidos
mediante este ensayo.
2.

Por la desaparición o descomposición del almidón, que es el sustrato inicial de la reacción
enzimática, ya que el almidón inicialmente reaccionará con el Lugol (solucióniodoiodurada) mostrando la característica coloración azul violeta intensa, que irá desapareciendo
conforme el almidón se vaya descomponiendo.
c) Reacción De Benedict

La reacción o prueba de Benedict...