Determinación De Proteínas: Comparación De Los Métodos De Biuret Y Lowry

UNIVERSIDAD MILITAR NUEVA GRANADA

Titulo de la Práctica de Laboratorio

(10)

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS: COMPARACIÓN DE LOS MÉTODOS
DE BIURET Y LOWRY Segunda parte.

Guías de Prácticas de
Laboratorio

Codificación: (1)
CIEVDE-G-054
Número de
Revisión No.: (3)
Páginas: (2)
1
4
Fecha Emisión: (4)
16/09/07

Laboratorio de: (5)
Biología
Titulo de la Práctica de Laboratorio:(6)

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS: COMPARACIÓN DE LOS MÉTODOS DE
BIURET Y LOWRY Segunda parte.

Elaborado por: (7)

Revisado por: (8)

Aprobado por: (9)

Myriam Judith Clavijo Ortiz
Docente Titular

Fernando Cantor
Presidente Comité Currículo

Fernando Cantor
Vicedecano Facultad de
Ciencias

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contra de los derechos de autor
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Control de Cambios

Razones del Cambio
Campo de aplicación y criterios de
evaluación.

Cambio a la Revisión #
0

Fecha de emisión16/09/07

1

20/05/09

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DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS: COMPARACIÓN DE LOS MÉTODOS
DE BIURET Y LOWRY Segunda parte.

1. FACULTAD O UNIDADACADÉMICA: Ciencias
2. PROGRAMA: Biología Aplicada
3. ASIGNATURA: Bioquímica
4. SEMESTRE: III
5. OBJETIVOS:
Comparar los diferentes métodos de determinación cuantitativa de proteínas, teniendo en
cuenta factores como sensibilidad, interferencia por sustancias no proteicas, rapidez y
exactitud.

6. COMPETENCIAS A DESARROLLAR: Desarrollo de competencias
instrumentales, interpretativas ypropositivas.
7. MARCO TEORICO:
En general no hay un método de determinación de proteínas completamente satisfactorio. La
escogencia del método dependerá de la nat uraleza de la proteína que se determina y de los
otros componentes de la muestra, de la exactitud y sensibilidad deseados, y de la rapidez con
que se requieran los resultados.
MÉTODO LOWRY
Esta es una modificación del método Folin-Ciocalteau. Se basa en la reacción de la proteína
con iones cúpricos en medio alcalino (tal como en Biuret), y la reducción del fosfomolibdato fosfotungstato del reactivo, por residuos de tirosina y triptófano presentes en la proteína.
Puede decirse entonces que mide los residu os de tirosina y triptófano presentes en la
proteína. Ofrece la ventaja de poderse aplicar a material seco o asoluciones. Es bastante
sensible, pues con el pueden analizarse cantidades del rango de 0.2 mg de proteína. Es más
sensible que los métodos de Biuret y de absorción en el ultravioleta (280 nm).
No requiere digestión y la intensidad de la coloración obtenida va a depender de la proteína,
pues los contenidos de tirosina y triptófano de las diferentes proteínas son variables. Esto
indica que lacoloración con Lowry no es tan proporcional con la concentración de la proteína,
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como lo es con la coloración de Biuret. Sin embargo, es más proporcional que el método de la
absorción a 280 nm.
Como de modo riguroso, la coloración no es estrictamente pro porcional a la concentración de
la proteína, las determinaciones deben efectuarse en el rango de la gráfica de absorbancia
vs. concentración, donde la pendiente sea mayor.
El ácido úrico, la guanina,...