EL PAPEL DEL ÁCIDO CÍTRICO EN EL METABOLISMO INTERMEDIO EN LOS TEJIDOS ANIMALES

EL PAPEL DEL ÁCIDO CÍTRICO EN EL METABOLISMO INTERMEDIO EN LOS TEJIDOS ANIMALES
POR H. A. Krebs y W. A. ​​JOHNSON
(De la Salida. De Phamacol., Univ. De Sheffield)
Durante la última década se ha avanzado mucho hecho en el análisis de la fermentación anaeróbica de los hidratos de carbono, pero muy poco se sabe hasta ahora acerca de las etapas intermedias de la degradación oxidativa de loshidratos de carbono. Una serie de reacciones se conocen en la que los derivados de hidratos de carbono participar y que son probablemente los pasos en la descomposición de los hidratos de carbono, y sabemos, además, de la obra de Szent-Györgyi 20) que el ácido succínico, ácido fumárico y ácido oxalacético jugar algún papel en la oxidación de hidratos de carbono, pero los detalles de este papel sontodavía oscuros.
En los experimentos presente trabajo se informa que arrojan nueva luz sobre el problema de las etapas intermedias de la oxidación de hidratos de carbono, junto con el trabajo de Szent-Gyorgyi 20), Stare y Baumann 19) y Martius y Knoop 13, l4) los nuevos experimentos nos permiten esbozar las principales etapas de la oxidación del azúcar en los tejidos animales.
I. Métodos.
1.Tejidos. Músculo de la pechuga paloma fue utilizada para la mayoría de los experimentos descritos en este documento. El tejido fue en una picadora Latapie inmediatamente después de matar y por lo general en suspensión en 3-7 volúmenes de 0, l de sodio M tampón fosfato (pH = 7,4). En la posterior dilución de la suspensión de la tasa de disminución del metabolismo.
2. La determinación cuantitativa deácido cítrico. El método de Pucher, Sherman y Vickery 17) se utilizó; ácido cítrico se oxida a pentabromoacetone que posteriormente se convierte por medio de sulfuro de sodio a un material de color adecuado para la determinación colorimétrica. Como ha señalado Pucher 0,8. el método es adecuado para la determinación de las cantidades de entre 0, ly 1 mg. Es bastante específica, sólo hay unas pocassustancias que producen otros también un material de color amarillo, y la única sustancia que interfiere en nuestros experimentos fue el ácido oxalacético. En solución pura 0,5 milimoles oxalacetato producido 1,98.10-3 milimol, ácido cítrico ". El rendimiento de ácido cítrico "se incrementa en 50 si el ácido pirúvico está presente al mismo tiempo y esto sugiere que el peróxido de bromo, hidrógenocomo. (Mantius y Knoop 13)) produce una síntesis de ácido cítrico a partir de ácido oxalacético y pirúvico, Este reacción interferir puede ser eliminado si el ácido oxalacético se descompone por calentamiento de la solución durante una hora en medio ácido o neutro weaklv después de desproteinización. Aunque oxaloacetato no está completamente descompuesto si el calor en solución pura de la destrucciónes prácticamente completa en el extracto desproteinizado tejido. Este efecto se explica MAV bv las observaciones de POLLAK 16) y LJUNGGHEN 10) que muestran una influencia catalítica de compuestos amino en las descomposiciones de b-ketonio ácidos.
3. La determinación cuantitativa del ácido succínico. El método utilizado fue una modificación de SZENT-GYORGYI’S 20) manométrica método. Los detallesse describen en detalle en otra parte.
4. La determinación cuantitativa de un ketonlutaric-ácido. El ácido a-ketoelutaric se determinó cuantitativamente por estimación de la cantidad de ácido succínico formada sobre la oxidación. En una alícuota del ácido succínico preformada y se determina la cifra obtenida se resta de la muestra tratada con el agente oxidante. Los agentes oxidantes adecuados sonpermanganato frío o sulfato cérico en medio ácido. Bajo nuestras condiciones de ambos reactivos dieron resultados idénticos. El método de sulfato cérico es mejor si cantidades significativas de ácido a-hydroxygiutaricacid o glutámico están presentes, ya que estas dos sustancias reaccionan más fácilmente con permanganato que con sulfato cérico para producir ácido succínico. El ácido cítrico, el...