ELECTROFORESIS SDS PAGE

Páginas: 3 (563 palabras) Publicado: 3 de marzo de 2015
Nombre: María Judith Bolaños Santana. 1°A.


ELECTROFORESIS SDS PAGE


El fenómeno de la electroforesis ofrece un procedimiento potente para separar proteínas y otras macromoléculas como el DNA y elRNA. La velocidad de migración de una proteína en un campo eléctrico depende de la fuerza de ese campo eléctrico, la carga neta de la proteína y el coeficiente de fricción.
Sirve para separarmezclas de proteínas en presencia del dodecilsulfato sódico (SDS), que cargado negativamente, desnaturaliza las proteínas en una proporción constante de una molécula de SDS por cada dos aminoácidos de laproteína.
Las separaciones electroforéticas se realizan casi siempre sobre geles ya que este sirve como un tamiz molecular que potencia la separación. Las cargas negativas de la multitud demoléculas de SDS unidas a la proteína inundan la carga normal de la proteína y hacen que todas las proteínas tengan la misma relación carga/masa. Sin embargo, las proteínas solo se diferenciarán por su masa.Para ello tenemos un gel y hacemos uso de marcadores de peso moleculares y diferentes concentraciones de poliacrilamida. Si aumentamos la concentración la poliacrilamida, disminuye el tamaño del poro yofrece mayor resistencia a la base de proteínas. Las proteínas se van a separar en función de su peso molecular y en función de su punto isoeléctrico, la fuerza que mueve las moléculas es elpotencial eléctrico.




En esta práctica, hemos sometido varias muestras a electroforesis en una lámina de gel de poliacrilamida. Hemos utilizado una micropipeta para colocar las disoluciones de lasproteínas en los pocillos creados en el gel. A continuación, colocamos la tapa sobre la cámara que contiene el gel y aplicamos el voltaje. Los complejos SDS–proteína, cargado negativamente, migran hacia elánodo, en la parte inferior del gel. La acción de cribado de un gel poroso de poliacrilamida separa las proteínas en función de su tamaño, siendo las mas pequeñas las que se mueven con mayor...
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