Electroforesis

Índice

Introducción………………………………………………………………………………………………… 1
Desarrollo……………………………………………………………………………………………………. 2, 3
Resumen……………………………………………………………………………………………………… 4
Conclusión…………………………………………………………………………………………………… 5
Biografía………………………………………………………………………………………………………. 6
Bibliografía…………………………………………………………………………………………………….7



Introducción

La electroforesis en gel de agarosa es unprocedimiento utilizado en varias áreas de la
Biotecnología, es un procedimiento analítico utilizado en laboratorios de investigación,
biomédicos y forenses. De los existentes tipos de electroforesis, la electroforesis en gel de
agarosa es el método más común y más utilizado. Es un método de separación
frecuentemente utilizado para analizar fragmentos de ADN generados por enzimas de
restricción,PCR, etc , y es un método analítico conveniente para determinar su tamaño en
un rango de 500-30.000 pares de bases. También puede ser utilizado para separar otras
biomoléculas como colorantes, ARN y proteínas.
Existen algunos tipos de electroforesis en gel de agarosa pero la electroforesis horizontal es
el más utilizado para separar moléculas de ADN en agarosa. Otros tipos como laelectroforesis vertical se utiliza para separar proteínas y utiliza geles de poliacrilamida.

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Desarrollo
1. Fundamentos de la electroforesis
 La electroforesis es la migración de solutos iónicos bajo la influencia de un campo eléctrico; estas partículas migran hacia el cátodo o ánodo (electrodos - y +), en dependencia de unacombinación de su carga, peso molecular y estructura tridimensional.
Es de destacar que a escala analítica, los métodos electroforéticos son de alta sensibilidad, poder de resolución y versatilidad, y sirven como método de separación de mezclas complejas de ácidos nucleicos, proteínas y otras biomoléculas, donde aportan un potente criterio de pureza. Se pueden conocer también mediante estastécnicas, las características ácido-básicas de las proteínas presentes en un extracto crudo, lo que da la información necesaria si se pretende realizar una separación cromatográfica basada en diferencias de carga. Es útil además para determinar otros parámetros como peso molecular, punto isoeléctrico y número de cadenas polipeptídicas de las proteínas.
La velocidad de migración (v) de la partícula esdirectamente proporcional al producto de su carga efectiva (q) y el gradiente de potencial eléctrico (E) e inversamente proporcional al coeficiente de fricción (f) relativo a la talla y forma de la molécula, o sea, a la resistencia que le ofrece el medio. 
 
 V = q E / f 

 La movilidad electroforética (Me) es un caso particular de la velocidad de migración de un ión, cuando se aplica un campoeléctrico de 1 V/cm. Su signo es igual al de la carga de la partícula.
La velocidad de migración electroforética depende de la densidad de carga de la molécula (relación carga / peso), del voltaje aplicado y de la porosidad del gel de electroforesis. El voltaje no se puede incrementar indiscriminadamente porque se genera un excesivo calor. En contraste, al aplicar bajo voltaje puede ocurrir unapobre separación, por causa de la difusión por tiempo muy prolongado de la corrida electroforética.1
La mayoría de las biomacromoléculas (proteínas, ácidos nucleicos y polisacáridos) poseen determinada carga eléctrica con grupos aniónicos y catiónicos capaces de disociarse. La carga neta de la partícula está dada por el pH del medio y puede ser modificada por la interacción con pequeñas moléculasde iones u otras macromoléculas. De lo anterior se deduce que el pH influye sobre la velocidad de migración de las moléculas.2 En el punto isoeléctrico de la biomolécula, pH al cual su carga neta es 0, esta no migra. Por debajo del punto isoeléctrico 3
tiene carga neta positiva y migra hacia el cátodo, y por encima del punto isoeléctrico tienen carga neta negativa y migra hacia el ánodo.
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