Ensayo de proteina
La trans- sialidasa de Trypanosoma cruzi (TcTS) , el agente de la enfermedad de Chagas, es una enzima única implicada en la invasión de célula- huésped de mamíferos, Desde T.cruzi es incapaz de sintetizar ácidos siálicos de novo
TcTS cataliza la transferencia de alfa-- residuos (2> 3)-sialil de los glicoconjugados del huésped a terminales de beta-galactopiranosilunidades presentes en la superficie del parásito. TcTS también juega un papel clave en la inmunomodulación del huésped infectado.
Pacientes con enfermedad de Chagas crónica TcTS obtener anticuerposneutralizantes que son capaces de inhibir la enzima. Ácido N-glicolilneuramínico se ha detectado en T. cruzi, y la trans-sialidasa fue señalada como la enzima implicada en su incorporación a glicoconjugadosde acogida.
Sin embargo, la N-glicolilneuramínico ácido alfa-(2 -> 3)-vinculada-oligosacáridos que contienen no han sido analizados como donantes en el T. cruzi trans-sialidasa de reacción. Eneste trabajo se estudió la capacidad de TcTS para transferir ácido N-glicolilneuramínico de Neu5Gc (alfa 2 -> 3) Gal (beta 1 -> 4) GlcbetaOCH (2) CH (2) N (3) (1) y Neu5Gc (alfa2 -> 3) Gal(beta 1 -> 3) GlcNAcbetaOCH (2) CH (2) N (3) (2) para el lactitol, N-acetillactosamina y lactosa como sustratos aceptores. Traslado de una era más eficiente (50-65%) que de 2 (20-30%) para los tresreceptores.
Las reacciones se inhibe cuando la enzima se preincubó con un anticuerpo neutralizante. K (m) se calcularon los valores de 1 y 2 y en comparación con 3'-sialyllactose utilizando comosustrato aceptor de lactitol. El análisis fue realizado por el alto rendimiento de intercambio de aniones (HPAEC) cromatografía. Una reacción de transferencia competitiva del compuesto 1 en presencia de...
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