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TIPOS DE CLONACIÓN

Hay muchos tipos de clonación, pero los podemos clasificar atendiendo a la finalidad perseguida. Por tanto, se las puede enumerar de la siguiente manera:

Los tipos de clonación que tienen como fin clonar moléculas de ADN o ARN. Son los siguientes:

- Clonación molecular o génica: Es aquel proceso que consiste en aislar una secuencia de ADN, quenos interese, y obtener múltiples copias de ella en un organismo.

Para este tipo de clonación, se emplean células hospedadoras, normalmente bacterias, en las cuales se les inserta el ADN deseado en su núcleo, con el fin de que cuando esta célula se reproduzca, haga múltiples copias de esas moléculas de ADN. Sin embargo, este proceso es más difícil de lo que he dicho, ya que para llevarlo acabo, hay que seguir los siguientes pasos: Primero, se aísla las moléculas de ADN de interés, luego se inserta en una bacteria principalmente el ADN, mediante los vectores de clonación o de clonado, que son básicamente pequeños moléculas (Plásmidos, bacteriófagos y cósmicos) transportadoras de ADN, que son capaces de transferir y replicar estos fragmentos ADN ajeno que llevan insertados, y ademástienen que contar con secuencias de reconocimiento que permitan la inserción del fragmento de ADN a clonar.

Finalmente, después de haber introducido los vectores de clonación con el ADN ajeno a la bacteria, a éstas se las pasa a un medio de cultivo para que se multipliquen, y al hacerlo, también vamos a obtener los fragmentos de ADN que necesitábamos.

- Clonación de ADN o ARNmediante la técnica de clonación acelular (PCR): La clonación acelular es un tipo de clonación de moléculas de ADN o ARN sin la intervención de una célula. Mediante este tipo de clonación, se produce un gran número de copias de ADN o de ARN, según que enzimas transcriptitas utilicemos. Cabe destacar que a partir de una sola cadena de ADN, en una tarde se pueden obtener hasta 100.000 millones de moléculasidénticas

Para su realización, nos valemos de la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa o “PCR”. Y, la polimerasa es una enzima capaz de transcribir o replicar ácidos nucleicos.

Para esta técnica, se utiliza el ADN polimerasa, que a partir de una cadena molde fabricará dos cadenas hijas idénticas. Por lo tanto, los elementos que se necesitan son: El fragmento de ADN quese desea, los cuatro tipos de desoxirribonucleótidos, dos oligonucleótidos de cadena sencilla que actuarán como cebadores (Que es una secuencia corta de ácido nucleico) y una cadena de ADN de polimerasa termoestable, ya que debe actuar a altas temperaturas.

Luego, tiene lugar un mecanismo simple, que consiste en repetir ciclos de síntesis. Cada ciclo consta de:

1. Una desnaturalizaciónde la doble cadena a copiar.
2. Una lectura de la hebra molde.
3. La incorporación de nucleótidos.
4. Mantener temperatura muy elevada durante todo el proceso.

De esta manera, en el primer ciclo se obtendrán dos cadenas, en el segundo se obtendrán cuatro, en el tercero se obtendrán ocho y así sucesivamente. Cada ciclo, que dura unos cinco minuto, equivale a una replicación, así que alcabo de veinte ciclos se obtienen 1048576 moléculas de ADN.

Se usa para detección de secuencias de ADN, para rastreo de mutaciones, diagnóstico de enfermedades, para estudios evolutivos, para la detección de células tumorales, para la amplificación de ADN para clonación celular, etc… .

- Clonación celular: Antes que nada, hay que decir que con este tipo de clonación no se obtienencélulas. Es decir, no es una clonación de células, sino que utiliza células, pero para clonar fragmentos de ADN. Es muy parecido al molecular, solo que éste, además de utilizar como células hospedadoras a las bacterias, también emplea a la levadura u otro tipo de células.

Para llevar a cabo este proceso, primero se tiene que conseguir muchas copias del ADN que se necesite clonar. Después,...