Estudiante

Identificación de Bacilos Gram Negativos
Nathalie Andrea Moreno1
1Departamento de Microbiología, Laboratorio de Bacteriologia General, Pontificia Universidad Javeriana Bogotá D.C.
*moreno.nathalie@javeriana.edu.co
Resumen
Introducción
Los microorganismos clasificados como bacilos Gram negativos, son bacterias que morfológicamente se observan en forma de barra o vara, que además de eso sonaquellos que no fijan el cristal violeta, debido a que poseen una capa de lipolisacarido 1. Son de gran interés de estudio, ya que estos poseen una capsula (antígeno K) lo que hace que sean mas virulentos 2, muchos de estos muy frecuentes en patología medicas.
Estos microorganismo son ubicuos, lo que genera su gran difunsion en la naturaleza, pudieron causar alguna enfermedad en el hombre, cones el caso de Salmonella, otros como Vibrio cholerae que esta adaptado al medio ambiente, además de haber otros que se adaptan muy bien al huésped como es el caso de Shigella. Otros bacilos gram negativos que tienen factores de virulencia bien definidos, haciendo que se consideren como patógenos primaria, como por ejemplo Yersinia pesti, Salmonella typhi, responsables de la Peste y la FiebreTifoidea respectivamente. Ademas de haber otros considerados oportunistas como es el caso de Acinetobacter y Pseudomonas. Y otros que hacen parte de la microflora normal del hombre como es caso de Escherichia coli 3.
Entre las familias mas destacadas del grupo de los bacilos gram negativos, se encuentra la familia de las Enterobacteriaceae. Estas son bacilos Gram negativos rectos, que tienen undiámetro aproximado de 0.3 a 1.5 micras; son móviles son flagelos perítricos. Pueden ser aerobios o anaerobios facultativos. No exigente nutricionalmente; Quimioorganotrofos, con un metabolismo fermentativo y respiratorio 3.
Entre sus características bioquímicas se destacan que son catalasa positivos y oxidasa negativos; reducen los nitratos a nitritos, entre otros 3.
El objetivo de este estudio erael de reconocer las características morfológicas y metabólicas de los bacilos Gram-negativos fermentadores y no fermentadores de la glucosa.
Materiales y métodos
Se sembró una muestra del microorganismo en diferentes medios de cultivo.
Glucosa OF, Lactosa OF y Sacarosa OF.
Se utilizan para evaluar simultáneamente la reacción de fermentación u oxidación del compuesto carbonado (azúcar) y lareducción de nitratos a nitritos (Nitrato de Potasio). El azul de bromotimol actúa como indicador de pH para la identificar la posible acidificación del medio como resultado de la fermentación del azúcar. La presencia del color azul en el medio indicara prueba positiva. (5)
Agar TSI
En este medio de cultivo diferencial se basa en la capacidad que tienen los microorganismos para fermentarcarbohidratos (Glucosa, Sacarosa y Lactosa) y a partir de eso producir CO2 y H2S. El rojo de fenol actúa como indicador de pH para la identificar la posible acidificación del medio como resultado de la fermentación del o los azúcares. La producción de H2S es a partir del tiosulfato se pone en evidencia por precipitación del sulfuro ferroso resultando una coloración negra. La producción de CO2 se puedeevidenciar por presencia de burbujas en el fondo del tubo. (5)
Prueba LIA
Este ensayo permite diferenciar los microorganismos que descarboxilan o desaminan el aminoácido LISINA. La descarboxilación del aminoácido formara aminas que provocaran un retorno al color original del medio (Violeta). La desaminación produce un ácido carboxílico y NH3 que se visualizara en la superficie por la aparición deun color rojo intenso. (5)
CITRATO DE SIMMONS
Medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias teniendo como base la capacidad de algunas de usar citrato como única fuente de carbono y energía. El aumento del pH por alcalinización del medio al tomar metabolizar el citrato, este es visible gracias a la presencia del indicador Azul de Bromotimol. (5)
UREA DE CHRISTENSEN
Medio...