Extraccion de adn bacteriano
El protocolo proporcionado en la practica muestra un método para la obtención del ADN genómico bacteriano que se ha comparado con el propuesto en el Kit S QuickGene para ADN en Plásmidos para la Para Extracción de ADN enplásmidos de la Escherichia coli (PL-S)
Fuji Photo Film Co., LTD desarrolló y patentó una revolucionaria membrana porosa para inmovilizar ácido nucleico. Debido a su gran área superficial específica, y a su porosidad fina y uniforme, QuickGene extrae satisfactoriamente ADN plasmídico con alto rendimiento; y más aún, con la utilización de su membrana, elimina la mayoría de los contaminantes.QuickGene utiliza la técnica de filtración a presión, la cual no puede utilizarse satisfactoriamente con membranas típicas de fibra de vidrio; utilizando la técnica de filtración a presión se puede usar con gran éxito una nueva instrumentación, compacta y automatizada para la rápida purificación de ácido nucleico.
Utilizando el kit S QuickGene ADN en Plásmidos junto con la serie QuickGene de SistemasAutomáticos de Aislamiento de Ácido Nucleico se podrá extraer y también purificar ADN plasmídico de E.coli con muy alta calidad y rendimiento. Adicionalmente, se pueden extraer simultáneamente y en sólo 6 minutos, 8 muestras de lisado. El ADN plasmídico, de alta calidad, purificado se puede utilizar para secuenciación de ADN, aplicaciones con PCR, digestión con enzimas de restricción, transfección yotras aplicaciones.
Este protocolo utiliza el etanol al 99% en cambio con el que se trabado estaba a una concentración del 70%; el alcohol isopropílico al 70% es el más barato ya que se puede comprar en el supermercado o en la farmacia. Sin embargo, contienen un mayor porcentaje de agua, por lo que es un poco más difícil precipitar el ADN con el. El alcohol etílico al 95% (que es 95% alcohol)trabaja bien. Este hace el ADN más fácil de colectar.
El alcohol en la solución de precipitación se utiliza para remover la concentración residual de sales y promover la precipitación del ácido nucleico. Cuando se trata de muestras con baja concentración de ácidos nucleicos, comúnmente se utiliza un volumen de muestra de isopropanol, en lugar de dos volúmenes de muestra cuando se trabaja conetanol. La
Precipitación del ADN es casi inmediata en presencia de la sal y el alcohol
Se necesitan preparar los reactivos en forma específica como se muestra en la metodología de este protocolo:
Los miembros de la familia del RNase H pueden ser encontrados en casi todos los organismos, de rachea y procariota a eucariota. En Réplica de la DNA, El RNase H es responsable de cortar el RNA...
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